人少突膠質(zhì)前體細(xì)胞--貼壁生長
人少突膠質(zhì)前體細(xì)胞--貼壁生長,提取自健康人腦組織原代分離,經(jīng)A2B5、Nestin免疫熒光染色鑒定,無HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、真菌污染。該細(xì)胞為中樞神經(jīng)系統(tǒng)關(guān)鍵的膠質(zhì)祖細(xì)胞,呈典型雙極/三極紡錘形,**嚴(yán)格貼壁生長**,在專用OPCM培養(yǎng)基中可穩(wěn)定增殖,具備分化為成熟少突膠質(zhì)細(xì)胞并形成髓鞘的潛能;廣泛應(yīng)用于多發(fā)性硬化、腦梗死髓鞘修復(fù)、神經(jīng)發(fā)育機(jī)制及神經(jīng)藥物篩選的體外模型研究,是神經(jīng)科學(xué)基礎(chǔ)科研與臨床轉(zhuǎn)化研究的核心工具細(xì)胞。
檢測原理
本細(xì)胞株的核心培養(yǎng)原理,聚焦貼壁生長的微環(huán)境需求與細(xì)胞生理特性:采用包被多聚賴氨酸/層粘連蛋白的培養(yǎng)器皿,為細(xì)胞提供穩(wěn)定的貼附基底;專用無血清OPCM培養(yǎng)基(含PDGF-AA、bFGF關(guān)鍵生長因子)維持細(xì)胞增殖與未分化狀態(tài);37℃、5% CO?、飽和濕度培養(yǎng)箱,保障貼壁細(xì)胞的代謝與形態(tài)穩(wěn)定。培養(yǎng)流程規(guī)范:復(fù)蘇后以推薦密度接種至包被好的培養(yǎng)瓶/板,靜置4-6小時(shí)完成貼壁;換液時(shí)輕柔操作避免沖擊貼壁細(xì)胞;傳代采用溫和yi酶消化(0.05% Trypsin-EDTA),鏡下觀察細(xì)胞間隙擴(kuò)大、胞體收縮時(shí)立即終止,防止損傷貼壁依賴性強(qiáng)的前體細(xì)胞;分化實(shí)驗(yàn)可更換OPCDM培養(yǎng)基(添加T3)誘導(dǎo)成熟少突膠質(zhì)細(xì)胞。
產(chǎn)品特點(diǎn)
本產(chǎn)品針對貼壁型人少突膠質(zhì)前體細(xì)胞的培養(yǎng)與研究需求優(yōu)化制備,核心特點(diǎn)如下:1. **純正貼壁表型**:細(xì)胞100%貼壁生長,無懸浮雜細(xì)胞,雙極/三極形態(tài)均一,免疫陽性率>95%;2. 質(zhì)控嚴(yán)格:每批次均通過無菌、支原體、病毒檢測及特異性標(biāo)志物(A2B5、Nestin、PDGFR-α)驗(yàn)證,附完整QC報(bào)告;3. 培養(yǎng)友好:適配常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)設(shè)備,培養(yǎng)基配方標(biāo)準(zhǔn)化,無需額外復(fù)雜配制,貼壁速度快,復(fù)蘇存活率>85%;4. 增殖與分化可控:在增殖培養(yǎng)基中可穩(wěn)定傳代5-6代,保持前體細(xì)胞特性;在分化培養(yǎng)基中可高效表達(dá)O4、MBP等成熟標(biāo)志物;5. 樣本適配場景廣:可用于細(xì)胞劃痕、共培養(yǎng)、藥物處理、基因編輯、免疫熒光、Western blot、qPCR等多種實(shí)驗(yàn);6. 儲存運(yùn)輸便捷:凍存細(xì)胞采用程序降溫,干冰運(yùn)輸,-196℃液氮可長期保存,復(fù)蘇流程簡單。
適用樣本類型
本細(xì)胞適配多種神經(jīng)科學(xué)研究的樣本與實(shí)驗(yàn)體系,適用樣本/實(shí)驗(yàn)場景包括:原代貼壁細(xì)胞培養(yǎng)(增殖/分化模型)、神經(jīng)炎癥與脫髓鞘損傷模型(LPS/溶卵lin脂誘導(dǎo))、髓鞘修復(fù)藥物篩選(小分子化合物、抗體、外泌體)、基因轉(zhuǎn)染/沉默、免疫共沉淀、細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)、移植瘤/腦立體定位注射的體內(nèi)模型樣本制備。推薦培養(yǎng)體系:多聚賴氨酸(10 μg/mL)包被的T25/T75培養(yǎng)瓶,OPCM無血清培養(yǎng)基,37℃、5% CO?培養(yǎng)箱;細(xì)胞接種密度1×10?-2×10? cells/cm2,2-3天換液一次,匯合度70%-80%時(shí)進(jìn)行傳代。
備注:(具體樣本處理方法請參考產(chǎn)品說明書)
儲存與注意事項(xiàng)
(一)儲存條件
1. 試劑盒未開封時(shí),需置于2-8℃冷藏避光保存,嚴(yán)禁冷凍,避免溫度波動影響試劑活性及產(chǎn)品性能,遠(yuǎn)離熱源與潮濕環(huán)境;2. 酶標(biāo)板、酶標(biāo)試劑、標(biāo)準(zhǔn)品等組件開封后,需密封保存于2-8℃,并在規(guī)定期限內(nèi)使用完畢,避免反復(fù)開封導(dǎo)致污染或試劑失效;3. 底物液、終止液需避光保存,底物液開封后建議盡快使用,避免因光照導(dǎo)致失效,影響顯色效果;4. 所有試劑儲存期間需避免劇烈震蕩,確保試劑活性穩(wěn)定,標(biāo)準(zhǔn)品稀釋后需密封冷藏,盡快使用。
(二)注意事項(xiàng)
1. 本產(chǎn)品僅供科研使用,嚴(yán)禁用于人體臨床治療或直接注射,操作時(shí)嚴(yán)格遵循無菌操作規(guī)范,佩戴PPE,避免細(xì)胞及培養(yǎng)基接觸皮膚黏膜;2. 復(fù)蘇時(shí)先將凍存管置于37℃水浴快速融化(1-2分鐘),嚴(yán)禁反復(fù)凍融;接種后靜置4-6小時(shí)再首ci換液,避免未貼壁細(xì)胞流失;3. 貼壁細(xì)胞對yi酶敏感,消化時(shí)間嚴(yán)格控制在1-2分鐘,鏡下觀察到細(xì)胞邊緣變圓、間隙增大立即終止,用含血清培養(yǎng)基或大豆yi酶抑制劑中和;4. 培養(yǎng)基開封后4℃避光保存,1個(gè)月內(nèi)用完;生長因子(如PDGF-AA)需分裝后-20℃凍存,避免反復(fù)凍融;5. 培養(yǎng)過程中避免頻繁移動培養(yǎng)瓶,防止貼壁細(xì)胞脫落;若出現(xiàn)細(xì)胞聚團(tuán)、貼壁不良,及時(shí)檢查包被質(zhì)量、培養(yǎng)基pH值與污染情況;6. 廢棄細(xì)胞、培養(yǎng)基、耗材按生物安全規(guī)范處理,高壓滅菌后丟棄;7. 嚴(yán)格按說明書操作,若有培養(yǎng)問題,可聯(lián)系廠家獲取技術(shù)支持,確保貼壁細(xì)胞的穩(wěn)定生長與實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性。
訂購信息
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以上信息僅供參考,具體請已產(chǎn)品說明書為準(zhǔn)。