小鼠雜交瘤細(xì)胞（抗LFA-1,Mac-1β亞基）
小鼠雜交瘤細(xì)胞（抗LFA-1,Mac-1β亞基）（Mouse Hybridoma Cell Line, Anti-LFA-1/Mac-1 β Subunit），由免疫Balb/C小鼠脾臟B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞經(jīng)PEG誘導(dǎo)融合、HAT選擇性培養(yǎng)及克隆化篩選獲得，經(jīng)ELISA、Western blot、免疫熒光驗證，可穩(wěn)定分泌特異性抗小鼠LFA-1（淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原1）和Mac-1（巨噬細(xì)胞抗原1）共同β亞基（CD18）的單克隆抗體，無HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、真菌污染。該細(xì)胞系呈半貼壁生長（輕微附著，可通過輕柔吹打分離），核心特征是兼具B淋巴細(xì)胞的抗體分泌能力與骨髓瘤細(xì)胞的無限增殖特性，分泌的抗體可特異性結(jié)合CD18，阻斷LFA-1/CD18、Mac-1/CD18信號通路，進(jìn)而抑制免疫細(xì)胞黏附、遷移及炎癥反應(yīng)；廣泛應(yīng)用于免疫細(xì)胞功能研究、炎癥機制探索、CD18蛋白檢測、免疫抑制劑篩選及相關(guān)診斷試劑研發(fā)，是免疫學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、炎癥醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)科研與臨床轉(zhuǎn)化的核心工具細(xì)胞，可輔助探索CD18異常表達(dá)與自身免疫性疾病、炎癥性疾病的關(guān)聯(lián)機制。
檢測原理
本細(xì)胞系的核心培養(yǎng)原理，聚焦雜交瘤細(xì)胞的融合特性與特異性抗體分泌需求，結(jié)合抗CD18抗體篩選要點：采用含胎牛血清的高糖DMEM培養(yǎng)基（添加HEPES調(diào)節(jié)pH），補充HAT選擇性成分（抑制未融合骨髓瘤細(xì)胞增殖），后期可更換HT培養(yǎng)基維持細(xì)胞生長，保障細(xì)胞增殖與抗CD18抗體穩(wěn)定分泌；半貼壁生長特性無需特殊包被培養(yǎng)器皿，輕微附著細(xì)胞可通過輕柔吹打分離；37℃、5% CO?、飽和濕度培養(yǎng)箱保障細(xì)胞代謝與抗體分泌穩(wěn)定，避免溫度波動影響細(xì)胞活性與抗體效價。培養(yǎng)流程規(guī)范：復(fù)蘇后按1×10?–2×10? cells/cm2接種，靜置4–6小時完成輕微貼壁，輕柔混勻后繼續(xù)培養(yǎng)；換液時操作輕柔，避免劇烈震蕩導(dǎo)致細(xì)胞脫落，每2–3天更換新鮮培養(yǎng)基；傳代時無需yi酶消化，輕柔吹打使細(xì)胞脫落，離心后重懸接種，維持細(xì)胞指數(shù)生長期（培養(yǎng)15~20小時），最da細(xì)胞密度不超過5×10? cells/ml；可通過ELISA法、免疫熒光法檢測細(xì)胞培養(yǎng)上清，驗證抗LFA-1、Mac-1β亞基（CD18）抗體的分泌能力與特異性，篩選高分泌株系。 產(chǎn)品特點
本產(chǎn)品針對該細(xì)胞的培養(yǎng)與抗體分泌需求優(yōu)化制備，核心特點如下：1. 抗體分泌穩(wěn)定：經(jīng)克隆化篩選，可穩(wěn)定分泌特異性抗LFA-1、Mac-1共同β亞基（CD18）單克隆抗體，抗體效價高、特異性強，可特異性結(jié)合CD18，不與其他免疫分子交叉反應(yīng)，傳代5–6代后仍保持穩(wěn)定分泌能力，無抗體分泌衰減現(xiàn)象；2. 質(zhì)控嚴(yán)格：每批次均通過無菌、支原體、病毒檢測及抗體特異性驗證（ELISA、Western blot、免疫熒光），附完整QC報告，確保細(xì)胞純度＞98%，無雜細(xì)胞污染，抗體與CD18結(jié)合特異性＞99%；3. 培養(yǎng)友好：適配常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)設(shè)備，培養(yǎng)基配方標(biāo)準(zhǔn)化（含HAT/HT成分），無需額外復(fù)雜配制，半貼壁生長特性無需包被培養(yǎng)器皿，復(fù)蘇存活率＞85%，新手易操作；4. 增殖能力強：可在常規(guī)培養(yǎng)條件下穩(wěn)定增殖，維持指數(shù)生長期，便于大量培養(yǎng)獲取高產(chǎn)量抗CD18抗體，滿足抗體純化與大規(guī)模實驗需求；5. 適配場景廣：可用于CD18蛋白定量檢測、免疫細(xì)胞黏附/遷移實驗、炎癥機制研究、免疫抑制劑篩選、Western blot、免疫熒光、免疫組化、抗體純化、診斷試劑研發(fā)及自身免疫性疾病相關(guān)研究，適配多種科研與轉(zhuǎn)化場景；6. 儲存運輸便捷：凍存細(xì)胞采用程序降溫，干冰運輸，-196℃液氮可長期保存，復(fù)蘇流程簡單，解凍后可快速恢復(fù)增殖與抗體分泌能力，適配長期科研實驗需求。
適用樣本類型
本細(xì)胞系適配多種免疫學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)研究的樣本與實驗體系，適用樣本/實驗場景包括：CD18蛋白檢測（細(xì)胞培養(yǎng)上清、血清、免疫細(xì)胞裂解液中CD18定量）、抗CD18抗體純化與鑒定、免疫細(xì)胞（淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞）黏附及遷移實驗、炎癥模型構(gòu)建（如LPS誘導(dǎo)炎癥）、免疫抑制劑篩選、LFA-1/CD18、Mac-1/CD18信號通路機制研究、免疫熒光與免疫組化實驗、診斷試劑研發(fā)（CD18檢測試劑盒）、基因轉(zhuǎn)染/沉默及細(xì)胞共培養(yǎng)實驗。推薦培養(yǎng)體系：常規(guī)T25/T75培養(yǎng)瓶，含10%胎牛血清的高糖DMEM培養(yǎng)基（添加HAT/HT成分、HEPES），37℃、5% CO?培養(yǎng)箱；細(xì)胞接種密度1.5×10? cells/cm2，2–3天換液一次，細(xì)胞密度達(dá)4×10? cells/ml時進(jìn)行傳代；抗體檢測采用ELISA法（檢測波長450nm）或免疫熒光法，可篩選高分泌株系擴大培養(yǎng)。
備注：（具體樣本處理方法請參考產(chǎn)品說明書）
儲存與注意事項
（一）儲存條件
1. 凍存細(xì)胞需置于-196℃液氮中長期保存，嚴(yán)禁-20℃直接冷凍或常溫放置，避免溫度波動導(dǎo)致細(xì)胞死亡，影響抗CD18抗體分泌穩(wěn)定性；2. 配套專用雜交瘤細(xì)胞培養(yǎng)基（含HAT/HT成分）開封后4℃避光保存，1個月內(nèi)用完；HAT/HT貯備液需分裝后-20℃凍存，避免反復(fù)凍融，防止失效；3. 胎牛血清、HEPES、ELISA檢測試劑、免疫熒光染色試劑等需按說明書溫度儲存，抗體檢測及染色相關(guān)試劑避光保存，防止降解影響檢測效果；4. 所有試劑儲存期間避免劇烈震蕩，確?；钚苑€(wěn)定，稀釋后的HAT/HT溶液密封冷藏，盡快使用，避免影響細(xì)胞增殖與抗體分泌。
（二）注意事項
1. 本產(chǎn)品僅供科研使用，嚴(yán)禁用于人體臨床治療或直接注射，操作時嚴(yán)格遵循無菌操作規(guī)范，佩戴PPE，避免細(xì)胞及培養(yǎng)基接觸皮膚黏膜，尤其處理雜交瘤細(xì)胞融合相關(guān)試劑時需加強防護(hù)；2. 復(fù)蘇時先將凍存管置于37℃水浴快速融化（1–2分鐘），嚴(yán)禁反復(fù)凍融；接種后靜置4–6小時，輕柔混勻，避免未貼壁細(xì)胞流失，確保細(xì)胞均勻分布；3. 該細(xì)胞為半貼壁生長，傳代時無需yi酶消化，僅需輕柔吹打即可使細(xì)胞脫落，避免用力吹打損傷細(xì)胞，影響抗CD18抗體分泌能力；4. 培養(yǎng)過程中需確保培養(yǎng)基中HAT/HT成分濃度穩(wěn)定，缺失會導(dǎo)致細(xì)胞增殖停滯、死亡；培養(yǎng)基開封后4℃避光保存，1個月內(nèi)用完，HAT/HT貯備液分裝-20℃凍存；5. 培養(yǎng)過程中避免頻繁移動培養(yǎng)瓶，防止細(xì)胞脫落，若出現(xiàn)細(xì)胞聚團、生長緩慢，及時檢查培養(yǎng)基pH值、血清質(zhì)量與污染情況；6. 廢棄細(xì)胞、培養(yǎng)基、耗材按生物安全規(guī)范處理，高壓滅菌后丟棄，尤其抗體檢測、免疫實驗后的廢棄物需雙重消毒；7. 嚴(yán)格按說明書操作，若有培養(yǎng)、抗體檢測、免疫實驗相關(guān)問題，可聯(lián)系廠家獲取技術(shù)支持，確保實驗結(jié)果的可靠性，適配CD18相關(guān)炎癥及免疫機制研究。
訂購信息
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以上信息僅供參考，具體請已產(chǎn)品說明書為準(zhǔn)。
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