人前列腺平滑肌細胞
人前列腺平滑肌細胞，是分離自成人前列腺間質(zhì)組織的原代貼壁細胞，為前列腺組織中承擔收縮功能、結(jié)構(gòu)維持與信號調(diào)控的核心細胞組分。該細胞經(jīng)體外分離、純化及多重鑒定，α-平滑肌肌動蛋白（α-SMA）、平滑肌肌球蛋白重鏈（SM-MHC）免疫熒光染色呈陽性，通過嚴格無菌檢測（無支原體、細菌、真菌及病毒污染），采用早期代次凍存，具備穩(wěn)定的體外培養(yǎng)特性與典型的平滑肌功能。作為前列腺組織的重要間質(zhì)細胞，其核心功能包括：維持前列腺腺體結(jié)構(gòu)張力、參與前列腺液分泌與排尿功能調(diào)控、介導炎癥反應及間質(zhì)重塑，并在良性前列腺增生、前列腺炎、前列腺癌等疾病進程中扮演關(guān)鍵角色。該細胞是探索前列腺疾病機制、篩選靶向藥物、研究細胞功能及信號通路的重要體外模型，適配免疫印跡、免疫熒光、Transwell、收縮實驗、ELISA、流式細胞術(shù)等多種實驗技術(shù)，廣泛應用于泌尿外科學、男科學、藥理學等科研領域。
細胞特性
該細胞具有明確的平滑肌細胞表型及功能特征，核心特性如下：細胞形態(tài)典型，呈梭形或紡錘形，為嚴格貼壁生長，胞體飽滿、兩端突起豐富，排列呈平行束狀或漩渦狀，匯合后形成連續(xù)單層，符合平滑肌細胞的典型形態(tài)特征；細胞特異性表達平滑肌細胞特征性標志物α-平滑肌肌動蛋白（α-SMA）、平滑肌肌球蛋白重鏈（SM-MHC）及Calponin，免疫熒光、免疫印跡檢測呈陽性，低表達或不表達上皮細胞標志物（如CK8/18）、內(nèi)皮細胞標志物（如CD31）及造血細胞標志物（如CD45），可特異性區(qū)分于前列腺上皮細胞、內(nèi)皮細胞、成纖維細胞等其他細胞類型；細胞純度≥90%，無上皮細胞、內(nèi)皮細胞、成纖維細胞及造血細胞污染，無支原體、細菌、真菌及病毒污染，細胞活性≥90%，每瓶凍存細胞數(shù)≥1×10?個，可穩(wěn)定傳代至3-5代，早期代次（P2-P3）收縮功能與表型保持zui'jia；細胞具備典型的平滑肌收縮特性，可在組胺、乙酰dan堿、內(nèi)皮素-1等刺激下發(fā)生收縮反應，可合成并分泌細胞外基質(zhì)（如Ⅰ型、Ⅲ型膠原蛋白、彈性蛋白）、生長因子（如TGF-β、PDGF）及炎癥因子（如IL-6、TNF-α），參與前列腺間質(zhì)重塑與炎癥調(diào)控，可響應前列腺微環(huán)境中的激素、細胞因子等刺激，參與前列腺疾病相關(guān)的信號通路調(diào)控；細胞為貼壁依賴性生長，適配常規(guī)平滑肌細胞培養(yǎng)體系，推薦使用纖維連接蛋白包被以增強細胞貼壁與收縮功能，培養(yǎng)過程中可穩(wěn)定維持細胞表型與生理功能。
產(chǎn)品特點
本產(chǎn)品具有活性高、純度高、特異性強、穩(wěn)定性好、適用性廣、操作便捷等核心特點。細胞經(jīng)嚴格組織酶解、密度梯度離心及差速貼壁法純化，純度≥90%，活性≥90%，細胞形態(tài)完整、突起清晰，可直接用于實驗，無需額外純化或誘導，降低實驗門檻；細胞特異性ji強，精準來源于前列腺組織，保留前列腺平滑肌細胞te有的表型與功能，能有效模擬前列腺平滑肌在生理及病理狀態(tài)下的收縮、分泌及炎癥應答，區(qū)別于膀胱、子宮等其他器官來源的平滑肌細胞，保障實驗的特異性與準確性；細胞生理功能穩(wěn)定，早期代次凍存，傳代過程中細胞形態(tài)、增殖能力、收縮功能及標志物表達無明顯衰退，能穩(wěn)定提供高活性原代細胞模型，保障實驗數(shù)據(jù)的重復性與可靠性；適配常規(guī)平滑肌細胞培養(yǎng)體系，培養(yǎng)條件溫和，操作流程簡潔，無需復雜實驗設備，適配各類基礎及轉(zhuǎn)化醫(yī)學實驗室使用；細胞無支原體、細菌、真菌污染，質(zhì)檢嚴格，可直接用于后續(xù)細胞功能研究、收縮實驗、藥物篩選、炎癥機制研究等各類實驗，減少實驗污染風險，保障實驗順利進行；適用范圍覆蓋泌尿外科學、男科學、藥理學、免疫學等多個領域，可滿足前列腺疾病機制、平滑肌細胞功能、間質(zhì)重塑、藥物篩選及療效評價等多種科研場景需求，同時可用于與前列腺上皮細胞、前列腺癌細胞共培養(yǎng)，構(gòu)建前列腺組織微環(huán)境模型，研究細胞間相互作用及前列腺疾病發(fā)生發(fā)展的協(xié)同機制。
四適用范圍與樣本（細胞）處理
本產(chǎn)品適用于前列腺疾病機制研究、平滑肌細胞功能與信號通路研究、藥物篩選與評價、共培養(yǎng)與三維模型構(gòu)建等場景；可用于良性前列腺增生（BPH）、前列腺炎、前列腺癌等疾病的發(fā)病機制研究，探究平滑肌細胞增生、凋亡異常、間質(zhì)與上皮相互作用及相關(guān)信號通路調(diào)控機制；可用于平滑肌細胞的增殖、遷移、凋亡、收縮及表型轉(zhuǎn)化調(diào)控機制研究，探索前列腺功能維持與異常的分子基礎；可用于抗前列腺增生、抗炎及抗腫瘤藥物的體外篩選與藥效評價，特別是針對平滑肌細胞功能調(diào)節(jié)的藥物研發(fā)；可與前列腺上皮細胞、前列腺癌細胞共培養(yǎng)，構(gòu)建前列腺組織微環(huán)境模型，研究細胞間相互作用及前列腺疾病發(fā)生發(fā)展的協(xié)同機制，也可構(gòu)建膠原凝膠三維培養(yǎng)模型，研究平滑肌細胞在三維環(huán)境中的收縮、遷移及基質(zhì)重塑功能。（具體培養(yǎng)步驟、細胞維護、實驗應用細節(jié)請參考產(chǎn)品說明書）
細胞處理與培養(yǎng)需嚴格遵循無菌操作規(guī)范，避免細胞污染；收到細胞后，立即置于37℃水浴鍋中快速解凍（1-2分鐘，嚴禁反復凍融），解凍后立即加入預熱至37℃的培養(yǎng)基（平滑肌細胞專用基礎培養(yǎng)基 + 10% 胎牛血清 + 專用生長添加劑）中，輕輕吹打混勻（動作輕柔，避免損傷細胞突起），4℃、300×g 離心5分鐘，棄上清液，用培養(yǎng)基重懸細胞后，接種至經(jīng)纖維連接蛋白包被的培養(yǎng)瓶中，置于37℃、5% CO?、飽和濕度培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)；培養(yǎng)24小時后更換新鮮培養(yǎng)基，去除未貼壁的死細胞及細胞碎片，后續(xù)每2-3天更換一次培養(yǎng)液；細胞匯合度達80%-90%時進行傳代，傳代比例為1:2–1:3，傳代時采用溫和的細胞分離方式，輕輕吹打瓶底使貼壁細胞脫落，離心后重懸接種，避免損傷細胞；該細胞為原代細胞，建議在P3代前完成核心實驗，以保證細胞的收縮功能及平滑肌特異性表型穩(wěn)定；如需進行收縮實驗或收集細胞、上清，可在細胞狀態(tài)良好時，按對應實驗方案操作，適配各類實驗需求。
儲存與注意事項
儲存條件
細胞凍存液（含10% DMSO、20% 胎牛血清及70% 平滑肌細胞專用基礎培養(yǎng)基）需采用程序化降溫盒（-1℃/min）緩慢降溫，置于-80℃密封保存，長期儲存（超過6個月）建議轉(zhuǎn)移至液氮（-196℃）中保存，嚴禁反復凍融、劇烈震蕩，防止細胞破裂、活性喪失及功能衰退；凍存細胞取出后需快速解凍，避免在-20℃~0℃區(qū)間停留過久，防止細胞損傷；未接種的凍存細胞需密封保存，做好標記（細胞名稱、凍存日期、批次、代次），避免混淆；培養(yǎng)基需置于2～8℃避光密封保存，避免反復凍融，使用前預熱至37℃，未用完的培養(yǎng)液需密封存放，建議1周內(nèi)用完；培養(yǎng)相關(guān)試劑（DMSO、包被試劑、生長添加劑等）需按對應要求儲存，確保試劑活性，實驗相關(guān)試劑需按需冷藏或冷凍保存，符合生物制品儲存的規(guī)范要求。
注意事項
1. 所有細胞操作需嚴格遵循無菌規(guī)范，實驗器具需提前高壓滅菌處理，接種、換液、傳代時更換吸嘴，避免交叉污染，影響細胞活性、表型及收縮功能；細胞培養(yǎng)過程中需保持培養(yǎng)環(huán)境穩(wěn)定，避免溫度、CO?濃度波動，防止細胞脫壁或活性下降，同時避免劇烈震蕩，防止細胞突起損傷，契合細胞培養(yǎng)的無菌操作與環(huán)境控制要求。
2. 細胞解凍、接種、傳代需嚴格遵循操作規(guī)范，避免反復凍融，否則會導致細胞破裂、活性喪失，影響培養(yǎng)效果及功能；解凍時需快速均勻，接種后及時置于培養(yǎng)箱中，避免細胞長時間暴露在室溫下；操作過程中動作輕柔，避免吹打過度，防止損傷細胞突起，影響細胞間連接及收縮功能，保障細胞活性與表型穩(wěn)定。
3. 細胞培養(yǎng)過程中需定期觀察細胞狀態(tài)，若出現(xiàn)細胞貼壁不良、脫壁、形態(tài)異常（胞體皺縮、折光性差、突起消失、形態(tài)不規(guī)則）或污染（培養(yǎng)液渾濁、出現(xiàn)絮狀物）等情況，需及時處理；培養(yǎng)基需定期更換，避免營養(yǎng)耗盡及代謝廢物積累，同時可根據(jù)細胞生長狀態(tài)調(diào)整傳代比例，確保細胞處于對數(shù)生長期，維持平滑肌表型及收縮功能穩(wěn)定，契合原代平滑肌細胞的培養(yǎng)維護要點，建議定期檢測細胞表面標志物表達，監(jiān)測細胞功能。
4. 實驗操作需嚴格遵循實驗室安全規(guī)范，妥善處理廢棄細胞、培養(yǎng)液及耗材，操作含DMSO的凍存液時需做好個人防護措施（佩戴手套、口罩、護目鏡），避免皮膚接觸和吸入；避免細胞接觸強氧化劑、重金屬離子及蛋白變性物質(zhì)，防止干擾細胞活性、表型及收縮功能；培養(yǎng)期間可采用無菌檢測手段定期監(jiān)測細胞無菌狀態(tài)，確保細胞質(zhì)量符合實驗及應用要求，契合生物實驗室安全與質(zhì)量控制規(guī)范；進行收縮實驗時，需嚴格控制刺激條件，確保實驗結(jié)果的準確性。
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