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首頁-產(chǎn)品系統(tǒng)-細胞-原代細胞-人肺巨細胞癌低轉(zhuǎn)移細胞株


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TECHNICAL ARTICLES
詳細介紹
細胞來源:源自人肺巨細胞癌組織,經(jīng)體外傳代培養(yǎng)、低轉(zhuǎn)移能力特異性篩選及克隆化純化,經(jīng)實驗驗證(Transwell轉(zhuǎn)移實驗、裸鼠移植實驗)確認其低轉(zhuǎn)移潛能,確保細胞維持肺巨細胞癌核心特征及低轉(zhuǎn)移表型。
形態(tài)特征:呈多形性,以巨細胞樣形態(tài)為主,貼壁生長,細胞體積較大,胞質(zhì)豐富,細胞核大且形態(tài)不規(guī)則,部分可見多核,顯微鏡下可見清晰的細胞輪廓,無雜細胞污染,生長狀態(tài)穩(wěn)定,增殖速率適中(低于高轉(zhuǎn)移肺巨細胞癌細胞株)。
功能特性:具備穩(wěn)定的增殖能力和低轉(zhuǎn)移表型,體外侵襲、遷移能力顯著低于高轉(zhuǎn)移肺巨細胞癌細胞株,MMP-2、MMP-9等促轉(zhuǎn)移因子表達水平較低,E-鈣粘蛋白等抑轉(zhuǎn)移因子表達相對較高,可模擬人低轉(zhuǎn)移型肺巨細胞癌的正常生理代謝、生長規(guī)律及低轉(zhuǎn)移特性,長期傳代不發(fā)生明顯的轉(zhuǎn)移表型改變,符合相關(guān)實驗與研發(fā)需求,可用于轉(zhuǎn)移調(diào)控機制研究。
純度與活性:細胞純度≥95%,活率≥90%,經(jīng)專用細胞消化液處理后可穩(wěn)定傳代,傳代3-5代內(nèi)細胞形態(tài)、活性及低轉(zhuǎn)移表型保持穩(wěn)定,無明顯衰老或表型異常,可維持典型的該細胞株特征。
無菌檢測:經(jīng)支原體、細菌、真菌檢測均為陰性,無外源污染物,可直接用于實驗培養(yǎng),保障實驗結(jié)果的可靠性。
高純度:采用專用細胞消化液結(jié)合低轉(zhuǎn)移能力篩選技術(shù),有效去除雜細胞、高轉(zhuǎn)移細胞及正常肺組織細胞,確保細胞純度,減少雜細胞對實驗結(jié)果的干擾,尤其保證低轉(zhuǎn)移表型的穩(wěn)定性。
低轉(zhuǎn)移表型穩(wěn)定:優(yōu)化的體外培養(yǎng)體系,全程嚴格控制溫度、濕度及營養(yǎng)條件,最da程度保留細胞的低轉(zhuǎn)移潛能,細胞侵襲、遷移能力穩(wěn)定,批次間差異小,長期傳代可穩(wěn)定維持低轉(zhuǎn)移特性,適配腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)實驗。
操作便捷:提供完整的細胞培養(yǎng)說明書,配套專用肺癌細胞培養(yǎng)基,細胞復(fù)蘇后可直接接種培養(yǎng),無需復(fù)雜的預(yù)處理步驟,貼壁培養(yǎng)方式適配常規(guī)實驗室條件,節(jié)省實驗時間。
適用性廣:可用于人肺巨細胞癌發(fā)病機制研究、低轉(zhuǎn)移腫瘤特性探究、腫瘤轉(zhuǎn)移調(diào)控機制研究(如PI3K/Akt信號通路、MMPs家族調(diào)控等)、抗腫瘤藥物篩選與毒性評價、腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)指標(biāo)檢測、免疫分析實驗及相關(guān)診斷試劑研發(fā)等多種實驗場景,兼容常規(guī)細胞實驗操作(如Western Blot、免疫熒光、Transwell侵襲/遷移實驗、ELISA等)。
穩(wěn)定性強:嚴格的質(zhì)量控制體系,每批次細胞均進行活性、純度、無菌性及轉(zhuǎn)移表型檢測,批內(nèi)、批間差異小,重復(fù)實驗結(jié)果一致性良好,有效降低實驗誤差,適配長期培養(yǎng)及各類科研實驗需求。
細胞凍存狀態(tài):置于-80℃冰箱短期儲存(1-3個月),長期儲存(超過3個月)需轉(zhuǎn)移至液氮(-196℃)中,避免反復(fù)凍融,防止細胞活性喪失、低轉(zhuǎn)移表型異常,肺巨細胞癌細胞對凍融敏感,需嚴格遵循儲存規(guī)范。
復(fù)蘇后細胞:復(fù)蘇后的細胞需立即接種至含預(yù)熱專用培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶,置于37℃、5% CO?培養(yǎng)箱中貼壁培養(yǎng),避免長時間放置在室溫或低溫環(huán)境,影響細胞貼壁與活性,防止低轉(zhuǎn)移表型改變。
配套培養(yǎng)基:專用肺癌細胞培養(yǎng)基需置于2-8℃冷藏避光儲存,嚴禁冷凍,開封后建議在1個月內(nèi)使用完畢,使用前需置于室溫平衡30分鐘,避免溫度差異影響細胞生長及低轉(zhuǎn)移表型穩(wěn)定性。
細胞復(fù)蘇:將凍存管從液氮或-80℃冰箱中取出,立即放入37℃水浴鍋中快速解凍(1-2分鐘),解凍后迅速用無菌吸管轉(zhuǎn)移至含預(yù)熱培養(yǎng)基的離心管中,離心(350 g,5分鐘)后棄上清,重懸細胞后接種至培養(yǎng)瓶,全程無菌操作,動作輕柔,避免污染與細胞損傷,肺巨細胞癌細胞較為脆弱,需減少機械損傷,防止表型異常。
細胞培養(yǎng):培養(yǎng)環(huán)境需嚴格控制為37℃、5% CO?,濕度保持在95%以上;采用貼壁培養(yǎng)方式,培養(yǎng)基更換頻率為每2-3天1次,可根據(jù)細胞密度適當(dāng)調(diào)整;傳代比例建議為1:2-1:3,傳代時采用專用細胞消化液處理,消化時間控制在3-5分鐘,避免消化過度損傷細胞,消化后需用專用終止液終止消化反應(yīng),確保細胞活性及低轉(zhuǎn)移表型穩(wěn)定。
樣本處理:若用于轉(zhuǎn)移相關(guān)檢測、蛋白提取或藥物作用實驗,細胞收集后需全程低溫處理(4℃),避免高溫導(dǎo)致蛋白降解、活性喪失,確保實驗結(jié)果準(zhǔn)確性;細胞裂解液需按照說明書步驟配制,避免雜質(zhì)干擾檢測結(jié)果,尤其注意保護促/抗轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白的活性。
無菌操作:全程嚴格遵循無菌實驗規(guī)范,實驗器具需提前滅菌,操作過程中避免手接觸細胞及培養(yǎng)基,防止細菌、支原體污染;若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基渾濁、細胞形態(tài)異常(如漂浮、變形、貼壁不良),需立即丟棄,避免污染擴散,肺巨細胞癌細胞抗污染能力較弱,需加強無菌管控。
表型維持:培養(yǎng)過程中可定期通過Transwell侵襲/遷移實驗、Western Blot等方法檢測細胞轉(zhuǎn)移能力及相關(guān)分子(如MMP-2、MMP-9、E-鈣粘蛋白等)表達水平,確保細胞維持低轉(zhuǎn)移表型;若出現(xiàn)轉(zhuǎn)移能力增強等表型異常,需及時調(diào)整培養(yǎng)條件或更換新鮮培養(yǎng)基。
細胞凍存:凍存細胞時,需使用專用凍存液(含10% DMSO+40%培養(yǎng)基+50%胎牛血清),緩慢降溫(4℃ 30分鐘→-20℃ 1小時→-80℃過夜→液氮長期儲存),避免降溫過快導(dǎo)致細胞內(nèi)冰晶形成,損傷細胞結(jié)構(gòu),提升復(fù)蘇成活率及后續(xù)低轉(zhuǎn)移表型穩(wěn)定性。
本產(chǎn)品僅用于科研用途,不用于臨床診斷、治療等醫(yī)學(xué)用途;實驗廢棄物(含細胞的培養(yǎng)基、離心液、細胞裂解液等)需按照生物安全規(guī)范妥善處理,避免環(huán)境污染。
產(chǎn)品有效期詳見外包裝盒,超過有效期的細胞嚴禁使用;使用過程中若出現(xiàn)細胞活性下降、表型異常、污染等情況,可聯(lián)系技術(shù)支持獲取解決方案。
如果您對上述產(chǎn)品感興趣,可通過“聯(lián)系我們"頁面提交需求,我們將及時回復(fù)。
以上信息僅供參考,具體請已產(chǎn)品說明書為準(zhǔn)。
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