大黃魚EPC細(xì)胞

檢測(cè)原理

產(chǎn)品特點(diǎn)

• 純度高：細(xì)胞純度≥95%，經(jīng)形態(tài)學(xué)鑒定、免疫組化染色及微生物檢測(cè)（細(xì)菌、真菌、支原體、魚類病毒），均無雜細(xì)胞及微生物污染，可直接用于實(shí)驗(yàn)，能有效保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和重復(fù)性，契合水產(chǎn)科研及細(xì)胞培養(yǎng)肉研發(fā)的嚴(yán)格要求；

• 生物學(xué)特性穩(wěn)定：細(xì)胞增殖能力強(qiáng)，可連續(xù)傳代培養(yǎng)，傳代過程中形態(tài)及生理功能無明顯退變，實(shí)驗(yàn)重復(fù)性強(qiáng)，可穩(wěn)定表達(dá)上皮細(xì)胞特異性標(biāo)志物，增殖與分化潛能穩(wěn)定，經(jīng)多次傳代后仍能保持良好的細(xì)胞活性，符合長(zhǎng)期科研及規(guī)?；囵B(yǎng)的需求，部分細(xì)胞可實(shí)現(xiàn)高密度增殖，細(xì)胞密度可達(dá)6×10?cell/mL以上；

• 功能完整性：保留該細(xì)胞的核心功能，具有良好的貼壁生長(zhǎng)能力和分化潛能，可響應(yīng)相關(guān)信號(hào)通路誘導(dǎo)，向肌肉細(xì)胞等方向分化，能支持大黃魚腫大細(xì)胞病毒等水產(chǎn)病毒的增殖，可用于細(xì)胞培養(yǎng)魚肉的規(guī)?；苽?，真實(shí)模擬大黃魚體內(nèi)細(xì)胞的生理特性，實(shí)驗(yàn)結(jié)果具有良好的應(yīng)用相關(guān)性；

• 操作便捷：采用魚類細(xì)胞專用標(biāo)準(zhǔn)化培養(yǎng)體系，解凍后可快速復(fù)蘇（復(fù)蘇存活率≥85%），培養(yǎng)條件溫和（常規(guī)25-28℃、5% CO?培養(yǎng)），無需特殊試劑及復(fù)雜操作，可適配可食性大孔微載體培養(yǎng)，適合常規(guī)實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)與操作，同時(shí)可滿足規(guī)?；囵B(yǎng)需求，降低實(shí)驗(yàn)及研發(fā)門檻，可參考標(biāo)準(zhǔn)化魚類細(xì)胞培養(yǎng)流程進(jìn)行復(fù)蘇、傳代及分化誘導(dǎo)操作；

• 適用性廣：可用于多種科研及產(chǎn)業(yè)研發(fā)場(chǎng)景，包括大黃魚細(xì)胞培養(yǎng)肉制備、肌肉細(xì)胞分化機(jī)制研究、水產(chǎn)病毒分離與鑒定、水產(chǎn)病害防控藥物篩選、基因功能驗(yàn)證及細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)優(yōu)化等，滿足不同科研及產(chǎn)業(yè)需求，同時(shí)可用于可食性微載體培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞三維培養(yǎng)優(yōu)化等場(chǎng)景，為大黃魚相關(guān)科研及細(xì)胞農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)發(fā)展提供可靠的細(xì)胞模型。

適用樣本類型

• 細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)：包括細(xì)胞增殖、凋亡、分化及傳代規(guī)律等基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)，用于研究其生物學(xué)行為及分化特性，可開展細(xì)胞培養(yǎng)條件優(yōu)化、分化誘導(dǎo)調(diào)控、微載體培養(yǎng)適配性等相關(guān)實(shí)驗(yàn)，同時(shí)可用于細(xì)胞增殖放大技術(shù)研究，為規(guī)?；囵B(yǎng)提供支撐；

• 細(xì)胞培養(yǎng)肉研發(fā)：用于大黃魚細(xì)胞培養(yǎng)肉的規(guī)?；苽?，可作為肌肉細(xì)胞、脂肪細(xì)胞的增殖載體，通過調(diào)控信號(hào)通路誘導(dǎo)細(xì)胞分化，結(jié)合可食性微載體及3D打印技術(shù)，構(gòu)建類似天然大黃魚肌肉組織的仿真魚排，契合細(xì)胞農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)研發(fā)需求；

• 分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)：用于魚類細(xì)胞相關(guān)基因、蛋白表達(dá)檢測(cè)，如RT-PCR、Western blot、免疫組化等實(shí)驗(yàn)，探究大黃魚細(xì)胞增殖、分化及病毒感染的分子機(jī)制，為水產(chǎn)病害防控及細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)優(yōu)化提供新思路，同時(shí)可用于病毒基因組及蛋白質(zhì)組研究；

• 水產(chǎn)病害與藥物研發(fā)：用于大黃魚腫大細(xì)胞病毒等水產(chǎn)病毒的分離、鑒定及增殖，可作為水產(chǎn)抗病du藥物的體外篩選模型，檢測(cè)藥物對(duì)病毒增殖及細(xì)胞損傷的抑制作用，為水產(chǎn)病害防控提供技術(shù)支撐，同時(shí)可用于水產(chǎn)養(yǎng)殖相關(guān)藥物的安全性評(píng)估；

• 其他：可用于魚類細(xì)胞共培養(yǎng)、細(xì)胞三維培養(yǎng)體系構(gòu)建、可食性微載體適配性驗(yàn)證等科研場(chǎng)景，具體應(yīng)用可結(jié)合實(shí)驗(yàn)需求調(diào)整，同時(shí)可用于驗(yàn)證新型培養(yǎng)技術(shù)對(duì)細(xì)胞增殖及分化能力的影響，建議控制細(xì)胞傳代次數(shù)，避免傳代過多導(dǎo)致分化潛能下降，可參考低血清培養(yǎng)基配方控制培養(yǎng)成本。

儲(chǔ)存與注意事項(xiàng)

（一）儲(chǔ)存條件

• 凍存細(xì)胞：置于-196℃液氮中長(zhǎng)期儲(chǔ)存，優(yōu)先選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期、活性穩(wěn)定的細(xì)胞進(jìn)行凍存，凍存時(shí)需使用魚類細(xì)胞專用凍存液（含20%FBS、10%DMSO、5%魚類細(xì)胞生長(zhǎng)因子），儲(chǔ)存時(shí)需確保液氮液位穩(wěn)定，避免細(xì)胞反復(fù)凍融（凍融次數(shù)≤3次），否則會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞活性下降、分化潛能降低或死亡，凍存后可在半年后復(fù)蘇檢測(cè)細(xì)胞存活率，確保細(xì)胞狀態(tài)良好，凍存細(xì)胞不宜長(zhǎng)期存儲(chǔ)在-80℃環(huán)境中，應(yīng)盡快轉(zhuǎn)移至液氮罐中；

• 復(fù)蘇后細(xì)胞：復(fù)蘇后的細(xì)胞需立即放入28℃水浴鍋中快速晃動(dòng)融化（時(shí)間控制在1分鐘內(nèi)），以800-1000r/min的速度離心5分鐘，去除凍存液中的DMSO后，接種至含該細(xì)胞專用wan全培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中，置于25-28℃、5% CO?、飽和濕度的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，24-48小時(shí)后更換培養(yǎng)基，去除死細(xì)胞及未貼壁細(xì)胞，新復(fù)蘇細(xì)胞24小時(shí)內(nèi)避免頻繁觀察和更換培養(yǎng)基，防止影響細(xì)胞貼壁及增殖，將培養(yǎng)瓶放入培養(yǎng)箱時(shí)，可輕輕旋松瓶蓋以保證氣體充分交換（若使用透氣性瓶蓋則無需旋松）；

• 培養(yǎng)基儲(chǔ)存：配套該細(xì)胞專用wan全培養(yǎng)基需置于4℃冷藏儲(chǔ)存，避免高溫、強(qiáng)光直射，儲(chǔ)存期限不超過1個(gè)月，使用前需恢復(fù)至室溫并輕輕搖勻，解凍血清時(shí)需逐步解凍，避免快速變溫，防止產(chǎn)生血清沉淀物，血清中出現(xiàn)的纖維蛋白、磷酸鈣等沉淀物不影響細(xì)胞生長(zhǎng)，可通過離心去除，可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求選用低血清培養(yǎng)基，降低培養(yǎng)成本，培養(yǎng)基中需添加新鮮魚類細(xì)胞生長(zhǎng)因子，現(xiàn)配現(xiàn)用，避免生長(zhǎng)因子失活；

• 運(yùn)輸條件：細(xì)胞運(yùn)輸采用干冰低溫運(yùn)輸（-80℃），運(yùn)輸過程中需做好防震、防潮措施，避免溫度波動(dòng)，運(yùn)輸時(shí)間不超過72小時(shí)，接收后立即放入對(duì)應(yīng)儲(chǔ)存環(huán)境，若無法立即儲(chǔ)存，可在干冰上暫時(shí)保存，避免常溫放置過久，運(yùn)輸過程中需做好細(xì)胞標(biāo)識(shí)，防止混淆，運(yùn)輸前可適當(dāng)調(diào)整細(xì)胞密度，確保復(fù)蘇后存活率。

（二）注意事項(xiàng)

• 本產(chǎn)品僅用于科研及水產(chǎn)、細(xì)胞農(nóng)業(yè)相關(guān)產(chǎn)業(yè)研發(fā)，嚴(yán)禁用于臨床診斷、治療或其他非科研用途，嚴(yán)禁直接接觸人體或用于人體相關(guān)實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)過程中需嚴(yán)格遵循動(dòng)物實(shí)驗(yàn)相關(guān)倫理要求，未預(yù)約者不得進(jìn)行細(xì)胞實(shí)驗(yàn)；

• 細(xì)胞復(fù)蘇、培養(yǎng)、傳代需嚴(yán)格遵循無菌操作原則，實(shí)驗(yàn)環(huán)境需符合細(xì)胞培養(yǎng)要求，實(shí)驗(yàn)器具需經(jīng)紫外燈照射30分鐘和通風(fēng)30分鐘后使用，操作前需用75%酒精對(duì)器具進(jìn)行消毒，避免微生物污染；該細(xì)胞為貼壁生長(zhǎng)細(xì)胞，傳代時(shí)可采用溫和消化方式，避免過度消化損傷細(xì)胞，傳代比例建議為1:3-1:5，確保細(xì)胞增殖空間，傳代過程中需避免細(xì)胞聚團(tuán)過多，若用于微載體培養(yǎng)，需控制微載體孔徑及細(xì)胞接種密度；

• 細(xì)胞培養(yǎng)過程中，需定期觀察細(xì)胞形態(tài)、生長(zhǎng)狀態(tài)及增殖情況，若培養(yǎng)基出現(xiàn)異常顏色，多為CO?溢出或細(xì)胞代謝異常導(dǎo)致，可輕輕旋松瓶蓋放入培養(yǎng)箱校正，異常顏色培養(yǎng)基可根據(jù)細(xì)胞狀態(tài)判斷是否繼續(xù)使用；若培養(yǎng)液變黃或變濁，可能是細(xì)胞密度過高或細(xì)菌污染，需及時(shí)傳代或丟棄處理；若發(fā)現(xiàn)真菌或霉菌污染，需用紫外燈照射培養(yǎng)箱去除孢子，并進(jìn)行消毒；培養(yǎng)過程中避免劇烈晃動(dòng)培養(yǎng)瓶，防止細(xì)胞脫落影響生長(zhǎng)，若進(jìn)行三維培養(yǎng)，需控制培養(yǎng)環(huán)境的通氣量；

• 處理細(xì)胞支原體污染時(shí)，建議優(yōu)先更換新的細(xì)胞株，若細(xì)胞珍貴，可嘗試使用支原體清除試劑進(jìn)行治療，支原體污染易復(fù)發(fā)，需做好后續(xù)監(jiān)測(cè)，支原體污染會(huì)影響細(xì)胞增殖、分化及病毒支持能力，需嚴(yán)格控制；

• 細(xì)胞換液時(shí)機(jī)可根據(jù)細(xì)胞狀態(tài)調(diào)整，復(fù)蘇后隔天更換一次培養(yǎng)基，后續(xù)每2-3天更換一次，換液時(shí)動(dòng)作輕柔，緩慢加入培養(yǎng)基，避免沖擊細(xì)胞，換液量為培養(yǎng)基總量的1/2-2/3，避免wan全更換培養(yǎng)基導(dǎo)致營(yíng)養(yǎng)成分驟變，影響細(xì)胞增殖及分化，換液時(shí)可收集上清液用于細(xì)胞代謝產(chǎn)物或病毒滴度檢測(cè)；

• 凍存細(xì)胞時(shí)，需將細(xì)胞懸液以800-1000r/min離心3-5分鐘，丟棄上清液后用預(yù)冷的魚類細(xì)胞專用凍存液重懸細(xì)胞，細(xì)胞密度控制在1×10?~1×10?個(gè)/ml，分裝后標(biāo)記細(xì)胞種類、凍存時(shí)間及操作人員，放入程序降溫盒置于-80℃過夜后，再轉(zhuǎn)移至液氮中長(zhǎng)期儲(chǔ)存，建立細(xì)胞凍存臺(tái)賬，便于追溯，凍存前可檢測(cè)細(xì)胞活性，確保凍存細(xì)胞功能穩(wěn)定；

• 取出液氮罐中的細(xì)胞時(shí)，務(wù)必加強(qiáng)個(gè)人防護(hù)，避免凍傷；取材及細(xì)胞操作時(shí)動(dòng)作要輕，避免牽拉和擠壓造成細(xì)胞機(jī)械損傷，切忌用水直接沖洗細(xì)胞，可用0.1M PBS輕輕沖洗，避免影響細(xì)胞活性及分化潛能；

• 實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)生的細(xì)胞廢液、廢棄培養(yǎng)基及用過的培養(yǎng)耗材，需經(jīng)滅菌處理后再丟棄，避免生物污染；操作人員需穿戴無菌手套、口罩、實(shí)驗(yàn)服，做好個(gè)人防護(hù)，實(shí)驗(yàn)結(jié)束后及時(shí)消毒實(shí)驗(yàn)臺(tái)面，實(shí)驗(yàn)廢棄物需按生物安全規(guī)范處理，病毒感染及細(xì)胞培養(yǎng)肉研發(fā)相關(guān)廢液需單獨(dú)收集處理，避免交叉污染。

訂購信息

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