人臍靜脈細(xì)胞融合細(xì)胞

檢測原理

產(chǎn)品特點

• 純度高：細(xì)胞純度≥95%，經(jīng)形態(tài)學(xué)鑒定、免疫組化染色及微生物檢測（細(xì)菌、真菌、支原體、病毒），均無雜細(xì)胞及微生物污染，可直接用于實驗，能有效保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性和重復(fù)性，契合血管生物學(xué)、腫瘤學(xué)及免疫學(xué)科研的嚴(yán)格要求；

• 生物學(xué)特性穩(wěn)定：細(xì)胞增殖能力強，可連續(xù)傳代培養(yǎng)，傳代過程中形態(tài)及融合特性無明顯退變，實驗重復(fù)性強，可穩(wěn)定表達(dá)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞及目標(biāo)細(xì)胞相關(guān)標(biāo)志物，融合相關(guān)基因表達(dá)穩(wěn)定，經(jīng)多次傳代后仍能保持良好的細(xì)胞活性及融合功能，符合長期科研實驗的需求；

• 功能完整性：保留融合細(xì)胞的核心功能，兼具人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的血管生成、屏障構(gòu)建等特性與目標(biāo)細(xì)胞的特異性功能，可正常響應(yīng)細(xì)胞融合相關(guān)信號通路，能模擬體內(nèi)細(xì)胞融合的生理及病理過程（如腫瘤細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞融合介導(dǎo)的轉(zhuǎn)移過程），實驗結(jié)果具有良好的臨床相關(guān)性，可用于細(xì)胞融合機制及相關(guān)疾病發(fā)病機制的深入探究；

• 操作便捷：采用細(xì)胞融合細(xì)胞專用標(biāo)準(zhǔn)化培養(yǎng)體系，解凍后可快速復(fù)蘇（復(fù)蘇存活率≥85%），培養(yǎng)條件溫和（常規(guī)37℃、5% CO?培養(yǎng)），無需特殊誘導(dǎo)試劑及復(fù)雜操作，適合常規(guī)實驗室培養(yǎng)與操作，降低實驗門檻，可參考標(biāo)準(zhǔn)化人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞及細(xì)胞融合細(xì)胞培養(yǎng)流程進(jìn)行復(fù)蘇、傳代及功能學(xué)實驗操作；

• 適用性廣：可用于多種科研場景，包括細(xì)胞融合機制研究、血管生成調(diào)控研究、腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)研究、藥物篩選與藥效評估、EGFR等融合相關(guān)基因功能驗證等，滿足不同科研需求，同時可用于血管化類腦器官構(gòu)建、細(xì)胞共培養(yǎng)等場景，為細(xì)胞融合及相關(guān)疾病科研及臨床轉(zhuǎn)化提供可靠的細(xì)胞模型。

適用樣本類型

• 細(xì)胞生物學(xué)實驗：包括細(xì)胞增殖、凋亡、傳代及細(xì)胞融合相關(guān)功能等基礎(chǔ)實驗，用于研究其生物學(xué)行為及融合特性，可開展細(xì)胞培養(yǎng)條件優(yōu)化、細(xì)胞融合調(diào)控機制、融合相關(guān)信號通路等相關(guān)實驗，同時可用于血清饑餓等條件對細(xì)胞周期及融合功能影響的研究；

• 血管生物學(xué)與腫瘤學(xué)相關(guān)研究：用于血管生成機制探究、腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)研究（如腫瘤細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞融合介導(dǎo)的轉(zhuǎn)移），可作為體外模型模擬體內(nèi)細(xì)胞融合的病理過程，結(jié)合CD31、EGFR等標(biāo)志物檢測，探究細(xì)胞融合在疾病發(fā)生發(fā)展中的分子機制，為血管相關(guān)疾病及腫瘤的診治提供新思路；

• 分子生物學(xué)實驗：用于人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞相關(guān)基因、目標(biāo)細(xì)胞相關(guān)基因及融合相關(guān)基因（如EGFR、syncytin-1）的表達(dá)檢測，如RT-PCR、Western blot、免疫組化等實驗，探究細(xì)胞融合的分子機制及相關(guān)疾病的發(fā)病機制，為疾病診斷及治療靶點篩選提供技術(shù)支撐；

• 藥物篩選與藥效評估：用于血管相關(guān)疾病、腫瘤等相關(guān)藥物（如抗血管生成藥物、細(xì)胞融合抑制藥物）的體外篩選，檢測藥物對細(xì)胞活性、融合功能及血管生成的影響，評估藥物療效及安全性，為藥物研發(fā)提供支撐，同時可用于藥物對細(xì)胞融合相關(guān)基因表達(dá)的調(diào)控研究；

• 其他：可用于血管化類腦器官構(gòu)建、細(xì)胞共培養(yǎng)、線粒體相關(guān)疾病研究（如線粒體基因突變相關(guān)疾病的細(xì)胞模型構(gòu)建）等科研場景，具體應(yīng)用可結(jié)合實驗需求調(diào)整，同時可用于驗證新型培養(yǎng)技術(shù)對細(xì)胞融合特性及功能的影響，建議控制細(xì)胞傳代次數(shù)，避免傳代過多導(dǎo)致融合特性改變。

儲存與注意事項

（一）儲存條件

• 凍存細(xì)胞：置于-196℃液氮中長期儲存，優(yōu)先選擇處于對數(shù)生長期、融合特性穩(wěn)定的細(xì)胞進(jìn)行凍存，凍存時需使用細(xì)胞融合細(xì)胞專用凍存液（含20%FBS、10%DMSO、5%內(nèi)皮細(xì)胞生長因子），儲存時需確保液氮液位穩(wěn)定，避免細(xì)胞反復(fù)凍融（凍融次數(shù)≤3次），否則會導(dǎo)致細(xì)胞活性下降、融合特性改變或死亡，凍存后可在半年后復(fù)蘇檢測細(xì)胞存活率及融合標(biāo)志物表達(dá)，確保細(xì)胞狀態(tài)良好，凍存細(xì)胞不宜長期存儲在-80℃環(huán)境中，應(yīng)盡快轉(zhuǎn)移至液氮罐中；

• 復(fù)蘇后細(xì)胞：復(fù)蘇后的細(xì)胞需立即放入37℃水浴鍋中快速晃動融化（時間控制在1分鐘內(nèi)），以800-1000r/min的速度離心5分鐘，去除凍存液中的DMSO后，接種至含專用wan全培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中（可提前用0.5%明膠包被培養(yǎng)瓶，提升貼壁效果），置于37℃、5% CO?、飽和濕度的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，24-48小時后更換培養(yǎng)基，去除死細(xì)胞及未貼壁細(xì)胞，新復(fù)蘇細(xì)胞24小時內(nèi)避免頻繁觀察和更換培養(yǎng)基，防止影響細(xì)胞貼壁、增殖及融合特性，將培養(yǎng)瓶放入培養(yǎng)箱時，可輕輕旋松瓶蓋以保證氣體充分交換（若使用透氣性瓶蓋則無需旋松）；

• 培養(yǎng)基儲存：配套專用wan全培養(yǎng)基需置于4℃冷藏儲存，避免高溫、強光直射，儲存期限不超過1個月，使用前需恢復(fù)至室溫并輕輕搖勻，解凍血清時需逐步解凍，避免快速變溫，防止產(chǎn)生血清沉淀物，血清中出現(xiàn)的纖維蛋白、磷酸鈣等沉淀物不影響細(xì)胞生長，可通過離心去除，培養(yǎng)基中需添加新鮮內(nèi)皮細(xì)胞生長因子，現(xiàn)配現(xiàn)用，避免生長因子失活，同時可根據(jù)細(xì)胞融合特性需求，在培養(yǎng)基中添加適量融合調(diào)控因子；

• 運輸條件：細(xì)胞運輸采用干冰低溫運輸（-80℃），運輸過程中需做好防震、防潮措施，避免溫度波動，運輸時間不超過72小時，接收后立即放入對應(yīng)儲存環(huán)境，若無法立即儲存，可在干冰上暫時保存，避免常溫放置過久，運輸過程中需做好細(xì)胞標(biāo)識，防止混淆，運輸前可適當(dāng)調(diào)整細(xì)胞密度，確保復(fù)蘇后存活率。

（二）注意事項

• 本產(chǎn)品僅用于科研，嚴(yán)禁用于臨床診斷、治療或其他非科研用途，嚴(yán)禁直接接觸人體或用于人體相關(guān)實驗，實驗過程中需嚴(yán)格遵循人體細(xì)胞實驗相關(guān)倫理要求，未預(yù)約者不得進(jìn)行細(xì)胞實驗，細(xì)胞取材及使用需符合倫理規(guī)范；

• 細(xì)胞復(fù)蘇、培養(yǎng)、傳代需嚴(yán)格遵循無菌操作原則，實驗環(huán)境需符合細(xì)胞培養(yǎng)要求，實驗器具需經(jīng)紫外燈照射30分鐘和通風(fēng)30分鐘后使用，操作前需用75%酒精對器具進(jìn)行消毒，避免微生物污染；該細(xì)胞系為貼壁生長細(xì)胞，傳代時可采用0.25%yi酶與0.02%EDTA-Na?按1:1混合的消化液溫和消化，避免過度消化損傷細(xì)胞，傳代比例建議為1:3-1:5，確保細(xì)胞增殖空間，傳代過程中需避免細(xì)胞聚團(tuán)過多，可通過輕柔吹打分散細(xì)胞；

• 細(xì)胞培養(yǎng)過程中，需定期觀察細(xì)胞形態(tài)、生長狀態(tài)及融合特性，若培養(yǎng)基出現(xiàn)偏紫，多為CO?溢出導(dǎo)致堿性增加，可輕輕旋松瓶蓋放入培養(yǎng)箱校正，變紫培養(yǎng)基可繼續(xù)使用；若培養(yǎng)液變黃或變濁，可能是細(xì)胞密度過高或細(xì)菌污染，需及時傳代或丟棄處理；若發(fā)現(xiàn)真菌或霉菌污染，需用紫外燈照射培養(yǎng)箱去除孢子，并進(jìn)行消毒；培養(yǎng)過程中避免劇烈晃動培養(yǎng)瓶，防止細(xì)胞脫落影響生長及融合特性，定期檢測細(xì)胞融合標(biāo)志物表達(dá)，確保細(xì)胞功能穩(wěn)定；

• 處理細(xì)胞支原體污染時，建議優(yōu)先更換新的細(xì)胞株，若細(xì)胞珍貴，可嘗試使用支原體清除試劑進(jìn)行治療，支原體污染易復(fù)發(fā)，需做好后續(xù)監(jiān)測，支原體污染會影響細(xì)胞增殖、融合特性及藥物響應(yīng)性，需嚴(yán)格控制；

• 細(xì)胞換液時機可根據(jù)細(xì)胞狀態(tài)調(diào)整，復(fù)蘇后隔天更換一次培養(yǎng)基，后續(xù)每2-3天更換一次，換液時動作輕柔，緩慢加入培養(yǎng)基，避免沖擊細(xì)胞，換液量為培養(yǎng)基總量的1/2-2/3，避免wan全更換培養(yǎng)基導(dǎo)致營養(yǎng)成分驟變，影響細(xì)胞增殖及融合特性，換液時可收集上清液用于融合相關(guān)蛋白或細(xì)胞因子檢測；

• 凍存細(xì)胞時，需將細(xì)胞懸液以800-1000r/min離心3-5分鐘，丟棄上清液后用預(yù)冷的細(xì)胞融合細(xì)胞專用凍存液重懸細(xì)胞，細(xì)胞密度控制在1×10?~1×10?個/ml，分裝后標(biāo)記細(xì)胞種類、凍存時間及操作人員，放入程序降溫盒置于-80℃過夜后，再轉(zhuǎn)移至液氮中長期儲存，建立細(xì)胞凍存臺賬，便于追溯，凍存前可檢測細(xì)胞融合標(biāo)志物表達(dá)，確保凍存細(xì)胞功能穩(wěn)定；

• 取出液氮罐中的細(xì)胞時，務(wù)必加強個人防護(hù)，避免凍傷；細(xì)胞操作時動作要輕，避免劇烈吹打造成細(xì)胞機械損傷，切忌用水直接沖洗細(xì)胞，可用0.1M PBS輕輕沖洗，避免影響細(xì)胞活性及融合特性；

• 實驗過程中產(chǎn)生的細(xì)胞廢液、廢棄培養(yǎng)基及用過的培養(yǎng)耗材，需經(jīng)滅菌處理后再丟棄，避免生物污染；操作人員需穿戴無菌手套、口罩、實驗服，做好個人防護(hù)，實驗結(jié)束后及時消毒實驗臺面，實驗廢棄物需按生物安全規(guī)范處理，含融合細(xì)胞及藥物相關(guān)廢液需單獨收集處理，避免交叉污染。

訂購信息

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