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首頁(yè)-產(chǎn)品系統(tǒng)-細(xì)胞-細(xì)胞系-BY-1404RM-S1獼猴皮膚細(xì)胞系


廠家實(shí)力
Manufacturer Strength
有效保修
Valid Warranty
質(zhì)量保障
Quality Assurance產(chǎn)品分類
PRODUCT CLASSIFICATION技術(shù)文章
TECHNICAL ARTICLES
詳細(xì)介紹
來(lái)源與建立背景
形態(tài)與生長(zhǎng)特征
功能特性
表型標(biāo)志物表達(dá):高表達(dá)成纖維細(xì)胞特異性標(biāo)志物,如波形蛋白(Vimentin)、α- 平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-SMA),免疫熒光陽(yáng)性率>95%;同時(shí)表達(dá)皮膚組織特異性蛋白,如 Ⅰ 型膠原蛋白、纖維連接蛋白,分泌量分別達(dá) 20μg/10?細(xì)胞 / 天和 15μg/10?細(xì)胞 / 天,接近原代皮膚成纖維細(xì)胞水平。
病毒敏感性:對(duì)皮膚嗜性病毒具有高度敏感性,尤其對(duì)猴痘病毒、牛痘病毒的感染效率達(dá) 90% 以上,病毒滴度可達(dá) 10?-10? PFU/mL,感染后 24 小時(shí)即可觀察到典型細(xì)胞病變(胞質(zhì)內(nèi)包涵體形成、細(xì)胞腫脹);對(duì)人乳頭瘤病毒(HPV)的支持能力突出,可維持病毒 episome 形式存在,為皮膚病毒潛伏感染研究提供模型。
創(chuàng)傷修復(fù)相關(guān)功能:在體外劃痕實(shí)驗(yàn)中,細(xì)胞遷移速率達(dá) 50μm / 小時(shí),可在 48 小時(shí)內(nèi)完成劃痕閉合;受損傷刺激后,轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子 -β1(TGF-β1)分泌量提升 3 倍,促進(jìn)膠原蛋白合成,模擬體內(nèi)創(chuàng)傷修復(fù)過(guò)程。
皮膚病毒感染機(jī)制研究
病毒入侵與擴(kuò)散研究:利用 RM-S1 細(xì)胞模擬皮膚微環(huán)境,解析猴痘病毒的皮膚傳播機(jī)制。通過(guò)熒光標(biāo)記病毒實(shí)驗(yàn),觀察到病毒通過(guò)細(xì)胞間連接擴(kuò)散,依賴 E-cadherin 介導(dǎo)的細(xì)胞黏附,阻斷該分子后病毒擴(kuò)散效率下降 70%,為阻斷皮膚病毒傳播提供靶點(diǎn)。
潛伏感染模型構(gòu)建:因可支持 HPV 持續(xù)感染,可用于研究病毒潛伏機(jī)制。例如,HPV16 在 RM-S1 細(xì)胞中可穩(wěn)定潛伏 60 天以上,通過(guò)檢測(cè) E6/E7 蛋白的低水平表達(dá),發(fā)現(xiàn)其通過(guò)表觀遺傳修飾(如 DNA 甲基化)維持潛伏狀態(tài),為開(kāi)發(fā)潛伏感染干預(yù)藥物提供依據(jù)。
創(chuàng)傷修復(fù)與皮膚再生研究
修復(fù)機(jī)制解析:通過(guò)構(gòu)建 RM-S1 細(xì)胞與角質(zhì)形成細(xì)胞共培養(yǎng)模型,研究皮膚創(chuàng)傷修復(fù)的細(xì)胞間相互作用。發(fā)現(xiàn)成纖維細(xì)胞分泌的肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(HGF)可促進(jìn)角質(zhì)形成細(xì)胞遷移,中和 HGF 后修復(fù)效率下降 50%,證實(shí)其在表皮再生中的關(guān)鍵作用。
再生材料評(píng)估:可用于測(cè)試新型生物材料的兼容性與促修復(fù)能力。例如,將膠原蛋白 - 殼聚糖支架與 RM-S1 細(xì)胞共培養(yǎng),細(xì)胞在支架上的增殖率比單純培養(yǎng)提升 2 倍,支架降解產(chǎn)物可促進(jìn) TGF-β1 分泌,為皮膚再生材料優(yōu)化提供數(shù)據(jù)。
外用藥物篩選與安全性評(píng)價(jià)
抗病du藥物篩選:基于對(duì)猴痘病毒的高敏感性,構(gòu)建 96 孔板藥物篩選模型,日均可檢測(cè) 300 種化合物。篩選出的阿xi洛韋衍生物對(duì)病毒的 EC??=2μM,且對(duì)細(xì)胞毒性低(CC??>100μM),動(dòng)物實(shí)驗(yàn)顯示其可縮短猴痘皮損愈合時(shí)間 30%,為皮膚病毒感染治療提供候選藥物。
化妝品與外用制劑安全性測(cè)試:替代動(dòng)物實(shí)驗(yàn)用于皮膚刺激性評(píng)估,通過(guò)檢測(cè)藥物對(duì) RM-S1 細(xì)胞活力、乳酸脫氫酶釋放的影響,結(jié)合 IL-6 分泌水平,建立皮膚刺激性評(píng)分標(biāo)準(zhǔn),與兔皮膚刺激實(shí)驗(yàn)結(jié)果一致性達(dá) 85%,符合 3R 原則(減少、替代、優(yōu)化)。
基礎(chǔ)培養(yǎng)方案
培養(yǎng)基:DMEM/F12(1:1)培養(yǎng)基添加 10% 胎牛血清、1% 非必需氨基酸,pH 維持在 7.2-7.4,可加入 5ng/mL 堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)促進(jìn)細(xì)胞增殖。
傳代流程:當(dāng)細(xì)胞融合度達(dá) 80% 時(shí),棄舊培養(yǎng)基,PBS 洗滌 2 次,加入 0.25% yi酶 - EDTA 溶液,37℃孵育 3 分鐘至細(xì)胞變圓,加入含血清的培養(yǎng)基終止消化,按 1:3 比例接種至新培養(yǎng)瓶,避免過(guò)度融合導(dǎo)致細(xì)胞形態(tài)改變。
凍存保護(hù):取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞,用含 10% DMSO 的wan全培養(yǎng)基重懸至密度 1×10?個(gè) /mL,程序降溫后液氮保存,復(fù)蘇時(shí) 37℃水浴快速解凍,直接接種至預(yù)熱培養(yǎng)基(無(wú)需離心),傳代 1 次后即可用于實(shí)驗(yàn)。
病毒感染與創(chuàng)傷模型操作
病毒接種:細(xì)胞以 5×10?個(gè) / 孔接種 24 孔板,培養(yǎng) 24 小時(shí)至融合度 70%,用無(wú)血清培養(yǎng)基稀釋病毒(MOI=0.1),37℃吸附 2 小時(shí),換含 2% 血清的維持液,每日觀察細(xì)胞病變,72 小時(shí)后通過(guò)蝕斑實(shí)驗(yàn)測(cè)定病毒滴度。
劃痕實(shí)驗(yàn):細(xì)胞鋪滿 6 孔板后,用 200μL 槍頭垂直劃痕,PBS 洗滌去除脫落細(xì)胞,加入含 1% 血清的培養(yǎng)基,0 小時(shí)和 48 小時(shí)拍照,ImageJ 軟件計(jì)算劃痕閉合率。
優(yōu)勢(shì):
組織特異性強(qiáng):保留皮膚成纖維細(xì)胞的功能特征,較通用細(xì)胞系(如 Vero)更適合皮膚相關(guān)研究,結(jié)果參考價(jià)值更高。
靈長(zhǎng)類模型優(yōu)勢(shì):與人類皮膚細(xì)胞的同源性高(基因序列一致性>95%),研究結(jié)果對(duì)人類疾病的轉(zhuǎn)化價(jià)值優(yōu)于嚙齒類細(xì)胞模型。
功能多樣性:既可用于病毒研究,又能支撐創(chuàng)傷修復(fù)與藥物測(cè)試,適用范圍廣泛。
局限性:
增殖能力有限:傳代超過(guò) 60 次后增殖速率下降約 20%,需定期復(fù)蘇早期凍存細(xì)胞。
培養(yǎng)成本較高:需添加生長(zhǎng)因子維持功能,培養(yǎng)基成本高于普通細(xì)胞系。
病毒譜局限:對(duì)非皮膚嗜性病毒(如呼吸道病毒)敏感性低,應(yīng)用范圍受限。
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