來源與形態(tài)：BHK-21 細(xì)胞最初分離自 1 日齡敘利亞倉(cāng)鼠的腎成纖維細(xì)胞，體外培養(yǎng)時(shí)呈成纖維樣形態(tài)，貼壁生長(zhǎng)，細(xì)胞呈長(zhǎng)梭形或星形，排列疏松，具有良好的延展性。在 37℃、5% CO?的培養(yǎng)條件下，增殖速度快，傳代周期約 1-2 天，可穩(wěn)定傳代超過百代仍保持活性。

遺傳特征：該細(xì)胞系為永生細(xì)胞系，核型呈非整倍體，染色體數(shù)目約 44-46 條，核型穩(wěn)定且無內(nèi)源性病毒污染。其基因組對(duì)外源基因的容納能力強(qiáng)，轉(zhuǎn)染后可高效表達(dá)目標(biāo)產(chǎn)物，同時(shí)對(duì)多種營(yíng)養(yǎng)缺陷型篩選標(biāo)記敏感，便于重組細(xì)胞株的篩選與純化。

優(yōu)勢(shì)：培養(yǎng)條件簡(jiǎn)單（可適應(yīng)含血清或無血清培養(yǎng)基）、病毒敏感性高（能支持多種病毒的完整復(fù)制周期）、增殖速度快且可懸浮培養(yǎng)，適合大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)；此外，細(xì)胞狀態(tài)穩(wěn)定，實(shí)驗(yàn)重復(fù)性好，被世界衛(wèi)生組織（WHO）推薦為疫苗生產(chǎn)的標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞系之一。

局限性：作為動(dòng)物細(xì)胞，其對(duì)部分人類病毒（如肝炎病毒）的敏感性較低，應(yīng)用范圍存在一定限制；長(zhǎng)期傳代可能導(dǎo)致細(xì)胞形態(tài)變異或病毒敏感性下降，需通過定期凍存原始細(xì)胞株來維持穩(wěn)定性。

培養(yǎng)條件：常規(guī)使用含 10% 胎牛血清的 MEM 或 DMEM 培養(yǎng)基，添加青mei素 - 鏈mei素預(yù)防污染。若用于大規(guī)模病毒培養(yǎng)，可采用懸浮培養(yǎng)體系（如旋轉(zhuǎn)瓶或生物反應(yīng)器），配合無血清培養(yǎng)基提高生產(chǎn)效率。培養(yǎng)過程中需控制細(xì)胞密度（建議不超過 80% 融合度），避免過度密集導(dǎo)致細(xì)胞形態(tài)改變。

污染防控：貼壁細(xì)胞易受細(xì)菌、支原體污染，需定期通過革蘭氏染色或 PCR 檢測(cè)污染情況；凍存時(shí)需加入 10% DMSO，在液氮中長(zhǎng)期保存，復(fù)蘇時(shí) 37℃水浴快速解凍，離心去除 DMSO 以減少細(xì)胞損傷。