JEG-3/VP16人絨癌細(xì)胞耐藥細(xì)胞系
JEG-3/VP16人絨癌細(xì)胞耐藥細(xì)胞系是在 JEG-3 人絨癌細(xì)胞系基礎(chǔ)上，通過逐步遞增濃度的依tuo泊苷（VP16）長期誘導(dǎo)篩選而獲得。依tuo泊苷作為臨床常用的hua療藥物，通過抑制拓?fù)洚悩?gòu)酶 Ⅱ 的活性，干擾 DNA 復(fù)制和轉(zhuǎn)錄，從而發(fā)揮抗癌作用。但在長期藥物壓力下，JEG-3 細(xì)胞發(fā)生適應(yīng)性改變，逐步獲得對(duì)依tuo泊苷及其他多種hua療藥物的耐受性，最終形成穩(wěn)定的耐藥細(xì)胞株 JEG-3/VP16。
從生物學(xué)特性來看，JEG-3/VP16 細(xì)胞仍保持上皮樣形態(tài)，以貼壁方式生長，但其細(xì)胞形態(tài)和生長特性與親本 JEG-3 細(xì)胞存在差異。在顯微鏡下，JEG-3/VP16 細(xì)胞體積增大，細(xì)胞核與細(xì)胞質(zhì)比例改變，細(xì)胞間連接更為松散。相較于 JEG-3 細(xì)胞，JEG-3/VP16 細(xì)胞增殖速度有所減緩，這可能是由于耐藥機(jī)制的建立消耗了部分細(xì)胞能量，同時(shí)也使得細(xì)胞對(duì)藥物的敏感性降低。此外，JEG-3/VP16 細(xì)胞的侵襲和遷移能力也發(fā)生變化，耐藥特性的獲得可能重塑了細(xì)胞外基質(zhì)的相互作用，影響其在體內(nèi)的轉(zhuǎn)移潛能。
JEG-3/VP16 細(xì)胞的耐藥機(jī)制復(fù)雜且多元。其一，細(xì)胞內(nèi)藥物外排泵蛋白如 P - 糖蛋白（P-gp）、多藥耐藥相關(guān)蛋白（MRP）的高表達(dá)，可將進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)的hua療藥物主動(dòng)泵出，降低細(xì)胞內(nèi)藥物濃度；其二，細(xì)胞內(nèi) DNA 損傷修復(fù)機(jī)制增強(qiáng)，能夠快速修復(fù)依tuo泊苷等藥物導(dǎo)致的 DNA 損傷，維持基因組穩(wěn)定性；其三，細(xì)胞凋亡通路受阻，抗凋亡蛋白 Bcl-2 家族表達(dá)上調(diào)，促凋亡蛋白 Bax 等表達(dá)下調(diào)，使得細(xì)胞難以啟動(dòng)凋亡程序，從而逃避藥物誘導(dǎo)的死亡；其四，細(xì)胞內(nèi)信號(hào)通路的改變，如 PI3K/AKT、MAPK 通路異常激活，增強(qiáng)細(xì)胞的存活和耐藥能力 。
在細(xì)胞培養(yǎng)方面，JEG-3/VP16 細(xì)胞同樣使用含 10% 胎牛血清的 DMEM/F12 培養(yǎng)基，培養(yǎng)條件為 37℃、5% 二氧化碳的恒溫恒濕環(huán)境。但為維持其耐藥特性，在培養(yǎng)過程中需定期添加低濃度的依tuo泊苷進(jìn)行篩選壓力維持。當(dāng)細(xì)胞融合度達(dá)到 80% - 90% 時(shí)，需及時(shí)按 1:3 - 1:5 的比例進(jìn)行傳代。
在科研與醫(yī)藥領(lǐng)域，JEG-3/VP16 耐藥株是研究絨癌耐藥機(jī)制的重要模型?？蒲腥藛T通過對(duì)比其與親本 JEG-3 細(xì)胞的基因表達(dá)譜、蛋白質(zhì)組學(xué)差異，挖掘關(guān)鍵耐藥基因和信號(hào)通路；在藥物研發(fā)方面，該耐藥株用于篩選能夠逆轉(zhuǎn)耐藥的新型藥物或聯(lián)合用藥方案，評(píng)估藥物對(duì)耐藥細(xì)胞的殺傷效果，為克服絨癌hua療耐藥、提高臨床治療效果提供理論依據(jù)和實(shí)踐指導(dǎo)。
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