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首頁-產(chǎn)品系統(tǒng)-細胞-細胞系-BY-0638LEC1倉鼠卵巢細胞系


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詳細介紹
LEC1倉鼠卵巢細胞系是生物醫(yī)學(xué)研究及生物制藥領(lǐng)域的重要工具,源自中國倉鼠(Cricetulus griseus)的卵巢組織,憑借易培養(yǎng)、高轉(zhuǎn)染效率及穩(wěn)定表達重組蛋白等特性,在科研與工業(yè)生產(chǎn)中占據(jù)關(guān)鍵地位。
一、細胞基本特性
來源與形態(tài):LEC1細胞分離自中國倉鼠的卵巢上皮細胞,體外培養(yǎng)時呈上皮樣形態(tài),貼壁生長,細胞排列緊密,呈多邊形或不規(guī)則圓形,邊緣清晰。在37℃、5%CO?的恒溫培養(yǎng)環(huán)境中,增殖速度穩(wěn)定,傳代周期約2-3天,可長期維持活性。
遺傳特征:該細胞系為永生細胞系,核型穩(wěn)定,染色體數(shù)目約22-24條,屬于非整倍體。其基因組背景清晰,不含內(nèi)源性病毒序列,且對多種篩選標記敏感,這一特性使其便于基因編輯和重組細胞株的構(gòu)建——通過導(dǎo)入外源基因,可高效篩選出穩(wěn)定表達目標蛋白的單克隆細胞。
二、核心應(yīng)用領(lǐng)域
重組蛋白生產(chǎn)
LEC1細胞是生物制藥中生產(chǎn)重組蛋白的理想宿主,尤其適用于表達結(jié)構(gòu)復(fù)雜的真核蛋白(如抗體、細胞因子、激素等)。其優(yōu)勢在于:能對蛋白進行正確的糖基化修飾(與人類細胞修飾模式接近),保證重組蛋白的生物活性;且可通過懸浮培養(yǎng)或無血清培養(yǎng)基規(guī)?;瘮U增,滿足工業(yè)級生產(chǎn)需求。目前,多種臨床藥物(如抗凝xue因子、疫苗佐劑)的生產(chǎn)均依賴該細胞系。
基因功能研究
因轉(zhuǎn)染效率高(脂質(zhì)體、電穿孔等方法均可實現(xiàn)高效轉(zhuǎn)染),LEC1細胞常被用于基因過表達或敲除實驗,探究基因在細胞增殖、凋亡、信號傳導(dǎo)中的作用。例如,通過CRISPR-Cas9技術(shù)敲除LEC1細胞中的特定基因,可觀察其對卵巢細胞分化或激素分泌的影響,為生殖生物學(xué)研究提供線索。
藥物篩選與毒性評估
在新藥研發(fā)中,LEC1細胞可用于評估候選藥物的細胞毒性、代謝穩(wěn)定性及靶向性。由于其來源于卵巢組織,對激素相關(guān)藥物的反應(yīng)尤為敏感,常被用于避yun藥、促排卵藥物的早期篩選,通過檢測細胞存活率、凋亡率及激素受體表達變化,預(yù)測藥物的潛在療效與副作用。
三、優(yōu)勢與局限性
優(yōu)勢:培養(yǎng)成本低,可適應(yīng)多種培養(yǎng)基(含血清或無血清);轉(zhuǎn)染效率顯著高于其他倉鼠卵巢細胞系(如CHO-K1);蛋白表達量高,且產(chǎn)物修飾接近人體天然蛋白,降低了藥物免疫原性風險。此外,其遺傳穩(wěn)定性使其能長期保存并重復(fù)使用,保證實驗結(jié)果的一致性。
局限性:作為動物細胞,其蛋白修飾模式與人類細胞仍存在細微差異(如某些糖鏈結(jié)構(gòu)),可能影響部分重組蛋白的臨床效果;且長期傳代可能導(dǎo)致基因漂移,需定期通過核型分析和蛋白表達檢測驗證細胞穩(wěn)定性。
四、培養(yǎng)與注意事項
培養(yǎng)條件:常規(guī)使用含10%胎牛血清的DMEM/F12培養(yǎng)基,添加青mei素-鏈mei素抑制污染。若用于規(guī)?;a(chǎn),可改用無血清懸浮培養(yǎng)基,減少外源蛋白干擾。培養(yǎng)過程中需避免細胞過度融合(建議密度維持在30%-80%),以防接觸抑制影響增殖。
污染防控:貼壁細胞易受支原體、真菌污染,需定期通過PCR檢測支原體,并用0.22μm濾膜過濾培養(yǎng)基。凍存時需加入10%二甲基亞砜(DMSO),在-80℃短期保存或液氮中長期保存,復(fù)蘇時快速解凍以減少細胞損傷。
五、研究意義
LEC1倉鼠卵巢細胞系的應(yīng)用,搭建了基礎(chǔ)研究與產(chǎn)業(yè)應(yīng)用的橋梁:在科研領(lǐng)域,它助力解析真核細胞的基因調(diào)控機制;在工業(yè)領(lǐng)域,它推動了生物制藥的規(guī)模化生產(chǎn),降低了藥物研發(fā)成本。其持續(xù)的技術(shù)迭代(如基因編輯優(yōu)化、培養(yǎng)體系升級),將進一步拓展其在精準醫(yī)療、合成生物學(xué)等領(lǐng)域的應(yīng)用前景,為人類健康事業(yè)提供更高效的工具支持。
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