NR8383大鼠肺泡巨噬細(xì)胞系
NR8383大鼠肺泡巨噬細(xì)胞系在肺部疾病研究領(lǐng)域應(yīng)用廣泛，憑借其保留的肺泡巨噬細(xì)胞核心功能，成為探究肺部炎癥反應(yīng)、感染機(jī)制及免疫調(diào)節(jié)的重要實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ?，為呼吸系統(tǒng)相關(guān)研究提供了可靠的細(xì)胞工具。
細(xì)胞特性與來(lái)源背景：該細(xì)胞系源于大鼠肺泡巨噬細(xì)胞，經(jīng)原代培養(yǎng)和永生化處理建立。細(xì)胞形態(tài)呈圓形或不規(guī)則形，胞質(zhì)豐富，可見(jiàn)大量吞噬顆粒，細(xì)胞核呈腎形或分葉狀，位于細(xì)胞一側(cè)，核仁不明顯。生長(zhǎng)方式以貼壁生長(zhǎng)為主，部分細(xì)胞輕微懸浮，傳代后 24 小時(shí)貼壁率約 92%。核心參數(shù)表現(xiàn)穩(wěn)定：倍增時(shí)間約 48 小時(shí)，連續(xù)傳代 50 次后仍保持穩(wěn)定的生物學(xué)特性；巨噬細(xì)胞特異性標(biāo)志物如 CD68、F4/80 等表達(dá)陽(yáng)性，經(jīng)流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)陽(yáng)性率達(dá) 94%，細(xì)胞純度達(dá) 95% 以上；無(wú)細(xì)菌、真菌、支原體及病毒污染，保障實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。
科研應(yīng)用價(jià)值：在肺部炎癥機(jī)制研究中，NR8383 細(xì)胞受脂多糖（LPS）刺激后，會(huì)大量分泌腫瘤壞死因子 -α（TNF-α）和白細(xì)胞介素 - 6（IL-6），24 小時(shí)分泌量分別達(dá) 320pg/ml 和 280pg/ml，可模擬肺部感染時(shí)的炎癥反應(yīng)，為解析炎癥信號(hào)通路提供理想模型。在抗感染研究方面，該細(xì)胞對(duì)肺炎鏈球菌、流感病毒等病原體具有吞噬能力，吞噬率分別達(dá) 65% 和 58%，能很好地模擬肺泡巨噬細(xì)胞的抗感染過(guò)程，助力抗感染藥物的篩選。此外，在肺纖維化研究中，轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子 -β1（TGF-β1）可誘導(dǎo)該細(xì)胞向促纖維化表型轉(zhuǎn)化，α- 平滑肌肌動(dòng)蛋白（α-SMA）表達(dá)量增加 2.3 倍，可用于探究巨噬細(xì)胞在肺纖維化中的作用機(jī)制。
科研應(yīng)用價(jià)值：在肺部炎癥機(jī)制研究中，NR8383 細(xì)胞受脂多糖（LPS）刺激后，會(huì)大量分泌腫瘤壞死因子 -α（TNF-α）和白細(xì)胞介素 - 6（IL-6），24 小時(shí)分泌量分別達(dá) 320pg/ml 和 280pg/ml，可模擬肺部感染時(shí)的炎癥反應(yīng)，為解析炎癥信號(hào)通路提供理想模型。在抗感染研究方面，該細(xì)胞對(duì)肺炎鏈球菌、流感病毒等病原體具有吞噬能力，吞噬率分別達(dá) 65% 和 58%，能很好地模擬肺泡巨噬細(xì)胞的抗感染過(guò)程，助力抗感染藥物的篩選。此外，在肺纖維化研究中，轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子 -β1（TGF-β1）可誘導(dǎo)該細(xì)胞向促纖維化表型轉(zhuǎn)化，α- 平滑肌肌動(dòng)蛋白（α-SMA）表達(dá)量增加 2.3 倍，可用于探究巨噬細(xì)胞在肺纖維化中的作用機(jī)制。
培養(yǎng)與保存規(guī)范：推薦使用含 10% 胎牛血清的 F-12K 培養(yǎng)基，添加 1% 抗生素混合液預(yù)防污染，培養(yǎng)環(huán)境為 37℃、5% CO?飽和濕度的恒溫培養(yǎng)箱。培養(yǎng)基應(yīng)每 2 天更換一次，確保營(yíng)養(yǎng)充足。傳代時(shí)，先吸去舊培養(yǎng)基，用 PBS 清洗細(xì)胞 2 次，加入溫和的消化液，37℃孵育 5-8 分鐘，待細(xì)胞松動(dòng)后，加入含血清的培養(yǎng)基終止消化，輕輕吹打制成細(xì)胞懸液，按 1:2-1:3 的比例接種到新的培養(yǎng)瓶中，每 4-5 天傳代一次，維持細(xì)胞融合度在 70%-80% 之間。凍存時(shí)，選用含 20% 胎牛血清和 10% DMSO 的 F-12K 培養(yǎng)基作為凍存液，將細(xì)胞濃度調(diào)整為 1×10?-5×10?個(gè) /ml，分裝到凍存管后，經(jīng)程序降溫盒梯度降溫至 - 80℃，次日轉(zhuǎn)入液氮長(zhǎng)期保存。復(fù)蘇時(shí)，將凍存管從液氮中取出，迅速放入 37℃水浴中融化，離心去除凍存液后，接種到含新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中，24 小時(shí)后更換培養(yǎng)基。
NR8383 大鼠肺泡巨噬細(xì)胞系以其穩(wěn)定的生物學(xué)特性、明確的功能特征及易于培養(yǎng)的優(yōu)勢(shì)，在肺部疾病基礎(chǔ)研究和藥物研發(fā)中發(fā)揮著重要作用，為推動(dòng)呼吸系統(tǒng)領(lǐng)域研究的發(fā)展提供了有力支持。
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