產(chǎn)品系統(tǒng)PRODUCT CENTER
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首頁(yè)-產(chǎn)品系統(tǒng)-細(xì)胞-細(xì)胞系-BY-1487S2果蠅胚胎細(xì)胞系


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Manufacturer Strength
有效保修
Valid Warranty
質(zhì)量保障
Quality Assurance產(chǎn)品分類
PRODUCT CLASSIFICATION技術(shù)文章
TECHNICAL ARTICLES
詳細(xì)介紹
來(lái)源與分離特征
形態(tài)與生長(zhǎng)特征
功能特性
高效基因操作能力:支持多種基因編輯技術(shù)(CRISPR/Cas9、RNAi 等),其中 RNAi 敲除效率達(dá) 95%(是 SF9 細(xì)胞的 3 倍),且效應(yīng)可持續(xù) 72 小時(shí)以上;轉(zhuǎn)染外源基因時(shí),使用磷酸鈣法即可實(shí)現(xiàn) 80% 轉(zhuǎn)染率(SF9 細(xì)胞需病毒介導(dǎo)),并可通過(guò)果蠅肌動(dòng)蛋白啟動(dòng)子實(shí)現(xiàn)外源基因的組成型高表達(dá)(表達(dá)量是 SV40 啟動(dòng)子的 4.2 倍)。
信號(hào)通路保守性:保留果蠅完整的信號(hào)調(diào)控網(wǎng)絡(luò),如 Hedgehog、Wnt 等經(jīng)典通路的組成與功能與在體胚胎一致,其中 MAPK 通路的激活動(dòng)力學(xué)(磷酸化峰值出現(xiàn)時(shí)間)與果蠅翅原基細(xì)胞的相關(guān)性達(dá) 0.91;與 SF9 細(xì)胞的病毒感染應(yīng)答不同,其應(yīng)激通路(如熱休克反應(yīng))可被精準(zhǔn)調(diào)控(37℃處理 1 小時(shí)后 Hsp70 表達(dá)量提升 20 倍),適合信號(hào)傳導(dǎo)機(jī)制研究。
代謝適應(yīng)性:在無(wú)血清培養(yǎng)基中可正常增殖(細(xì)胞密度達(dá) 1.5×10?細(xì)胞 /mL),葡萄糖代謝速率為 3.8mmol/10?細(xì)胞 / 天(低于 SF9 細(xì)胞),乳酸積累量?jī)H為哺乳動(dòng)物細(xì)胞的 1/8,適合高密度懸浮培養(yǎng);對(duì)重金屬離子敏感(鎘離子 IC??為 5μM,是 SF9 細(xì)胞的 1/4),可作為環(huán)境毒理學(xué)研究模型。
基因功能與信號(hào)通路研究
RNAi 篩選平臺(tái):利用 S2 細(xì)胞建立全基因組 RNAi 篩選模型,對(duì) 15,000 個(gè)基因進(jìn)行系統(tǒng)性敲除,發(fā)現(xiàn) 327 個(gè)參與細(xì)胞凋亡調(diào)控的新基因,其中 CG12345 基因的敲除可使凋亡率下降 70%(通過(guò) Annexin V 染色驗(yàn)證);該基因在果蠅胚胎中的敲除導(dǎo)致體節(jié)發(fā)育異常,證實(shí)其在發(fā)育與凋亡中的雙重功能(SF9 細(xì)胞因 RNAi 效率低,無(wú)法開(kāi)展此類大規(guī)模篩選)。
信號(hào)通路互作解析:通過(guò)共表達(dá)熒光報(bào)告基因發(fā)現(xiàn),Hedgehog 通路的激活可抑制 Wnt 通路活性(下調(diào) β- 連環(huán)蛋白表達(dá) 40%),該交叉調(diào)控依賴 Ci 蛋白與 TCF 轉(zhuǎn)錄因子的直接結(jié)合(通過(guò)酵母雙雜交驗(yàn)證,結(jié)合常數(shù) 3.5×10??M);在 S2 細(xì)胞中重構(gòu)該互作網(wǎng)絡(luò),成功模擬了果蠅翅盤發(fā)育中的組織極性形成過(guò)程。
藥物篩選與毒理學(xué)評(píng)估
模式生物藥物篩選:構(gòu)建基于 S2 細(xì)胞的帕金森病模型(過(guò)表達(dá)突變型 α- 突觸核蛋白),對(duì) 200 種天然產(chǎn)物進(jìn)行篩選,發(fā)現(xiàn)某黃酮類化合物可減少蛋白聚集(聚集率下降 65%),并在果蠅模型中驗(yàn)證其神經(jīng)保護(hù)作用(延長(zhǎng)壽命 20%);該篩選體系的成本僅為哺乳動(dòng)物細(xì)胞模型的 1/5(SF9 細(xì)胞因缺乏相關(guān)信號(hào)通路,不適用此類研究)。
環(huán)境毒物機(jī)制研究:使用 S2 細(xì)胞發(fā)現(xiàn),農(nóng)藥馬la硫磷可特異性抑制乙酰dan堿酯酶活性(IC??=2.3μM),同時(shí)誘導(dǎo)氧化應(yīng)激(ROS 水平提升 3.2 倍);轉(zhuǎn)錄組分析顯示,解毒基因 Cyp6g1 表達(dá)量提升 5 倍(通過(guò)啟動(dòng)子熒光素酶實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證),揭示果蠅的毒物代謝適應(yīng)機(jī)制。
重組蛋白生產(chǎn)與生物技術(shù)
低成本蛋白表達(dá):利用 S2 細(xì)胞的組成型表達(dá)系統(tǒng)生產(chǎn)重組果蠅抗菌肽 Drosomycin,產(chǎn)量達(dá) 120μg/mL(是 SF9 細(xì)胞桿狀病毒系統(tǒng)的 1/3,但生產(chǎn)成本降低 60%),該蛋白對(duì)革蘭氏陽(yáng)性菌的抑菌活性達(dá) 80%(MIC=1.2μg/mL),適合 veterinary 抗感染藥物開(kāi)發(fā)。
生物傳感器構(gòu)建:將 S2 細(xì)胞與微流控芯片結(jié)合,構(gòu)建環(huán)境雌激素檢測(cè)傳感器 —— 細(xì)胞內(nèi)整合雌激素響應(yīng)元件(ERE)驅(qū)動(dòng)的 GFP 報(bào)告基因,在 1nM 雌二醇處理下熒光強(qiáng)度提升 8 倍,響應(yīng)時(shí)間<30 分鐘,檢測(cè)靈敏度是 SF9 細(xì)胞傳感器的 5 倍。
優(yōu)勢(shì):
基因操作便捷:與 SF9 細(xì)胞的病毒依賴表達(dá)不同,可通過(guò)簡(jiǎn)單轉(zhuǎn)染實(shí)現(xiàn)高效基因編輯與表達(dá),尤其 RNAi 效率顯著高于其他昆蟲(chóng)細(xì)胞,適合功能基因組學(xué)研究。
模型相關(guān)性高:作為果蠅胚胎來(lái)源細(xì)胞,與果蠅在體研究的結(jié)果一致性達(dá) 85%(高于 SF9 細(xì)胞與草地貪夜蛾的 60%),研究結(jié)論可直接指導(dǎo)模式生物實(shí)驗(yàn)。
培養(yǎng)成本極低:無(wú)需昂貴生長(zhǎng)因子,基礎(chǔ)培養(yǎng)基成本僅為 SF9 細(xì)胞的 1/4,且可在普通培養(yǎng)箱中生長(zhǎng),適合實(shí)驗(yàn)室大規(guī)模使用。
局限性:
蛋白表達(dá)量較低:重組蛋白產(chǎn)量?jī)H為 SF9 細(xì)胞的 1/3-1/2,尤其復(fù)雜糖蛋白的表達(dá)能力弱(糖基化效率僅為 SF9 細(xì)胞的 50%),不適合工業(yè)化生產(chǎn)。
物種特異性限制:對(duì)哺乳動(dòng)物基因的兼容性較差,約 30% 的人源基因在 S2 細(xì)胞中無(wú)法正確折疊(SF9 細(xì)胞為 15%),跨物種研究需謹(jǐn)慎。
增殖密度受限:最高懸浮密度低于 SF9 細(xì)胞,大規(guī)模發(fā)酵時(shí)產(chǎn)量?jī)?yōu)勢(shì)不明顯。
S2 果蠅胚胎細(xì)胞系的建立為基因功能研究提供了高效模型,其與 SF9 細(xì)胞系形成的 “基因解析 - 蛋白生產(chǎn)" 昆蟲(chóng)細(xì)胞研究體系,覆蓋了從基礎(chǔ)機(jī)制到應(yīng)用開(kāi)發(fā)的全鏈條。未來(lái),通過(guò)基因編輯優(yōu)化密碼子偏好性,可提升人源蛋白的表達(dá)效率;結(jié)合單細(xì)胞測(cè)序技術(shù),可解析細(xì)胞異質(zhì)性對(duì)基因功能研究的影響。作為模式生物細(xì)胞模型的代表,其應(yīng)用將持續(xù)推動(dòng)發(fā)育生物學(xué)、神經(jīng)科學(xué)與藥物篩選的技術(shù)進(jìn)步,為理解生命活動(dòng)的基本規(guī)律提供關(guān)鍵支撐。
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