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首頁-產品系統(tǒng)-細胞-細胞系-BY-1296BHK-21 C-13倉鼠腎成纖維細胞系
技術文章
TECHNICAL ARTICLES
詳細介紹
來源與形態(tài):該細胞系源自 BHK-21 母系細胞,經單細胞克隆技術篩選獲得純度更高的亞系(“C-13" 代表克隆編號)。體外培養(yǎng)時呈典型成纖維樣形態(tài),貼壁生長,細胞呈長梭形或星形,排列疏松且邊界清晰,較原始 BHK-21 細胞形態(tài)更均一。在 37℃、5% CO?的培養(yǎng)條件下,增殖速度快,傳代周期約 1-2 天,可適應貼壁培養(yǎng)與懸浮培養(yǎng),尤其適合無血清培養(yǎng)基馴化,能滿足規(guī)?;a需求。
遺傳特征:保留 BHK-21 細胞的非整倍體核型(染色體數目約 44-46 條),核型穩(wěn)定性優(yōu)于母系細胞,基因組背景清晰且無內源性病毒序列。其成纖維細胞特性顯著,分泌膠原蛋白等細胞外基質成分的能力較強,同時對外源基因的轉染效率高,可通過抗性篩選快速獲得穩(wěn)定表達株,長期傳代后仍能維持生物學特性的一致性。
病毒培養(yǎng)與疫苗生產
病毒學基礎研究
重組蛋白表達與生物制劑開發(fā)
優(yōu)勢:遺傳均一性高,實驗重復性優(yōu)于原始 BHK-21 細胞;病毒敏感性強,對多種病毒的增殖效率高且穩(wěn)定;培養(yǎng)適應性好,可在貼壁與懸浮體系中高效增殖,便于規(guī)?;a;無內源性病毒污染,生物安全性高,被世界衛(wèi)生組織(WHO)推薦為疫苗生產的合規(guī)細胞系。
局限性:對部分人類病毒(如肝炎病毒)的敏感性較低,應用范圍存在一定限制;懸浮培養(yǎng)時易形成細胞聚集體,需通過培養(yǎng)基優(yōu)化減少聚集;長期傳代可能導致病毒敏感性下降,需定期凍存原始克隆株以維持特性。
培養(yǎng)條件:常規(guī)使用含 10% 胎牛血清的 MEM 培養(yǎng)基,添加青mei素 - 鏈mei素抑制細菌污染。若用于疫苗生產,可改用無血清懸浮培養(yǎng)基,減少外源蛋白干擾,提升產物純度。培養(yǎng)過程中需控制細胞密度(貼壁培養(yǎng)融合度不超過 80%),避免過度密集導致細胞形態(tài)改變或增殖停滯。
污染防控:貼壁細胞易受支原體污染,需定期通過 PCR 或熒光染色檢測;凍存時使用含 10% DMSO 的凍存液,液氮保存可長期維持活性,復蘇時 37℃水浴快速解凍,離心去除 DMSO 以降低細胞損傷。
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