XMRPDSC2012大鼠胰腺導(dǎo)管干細(xì)胞系
XMRPDSC2012大鼠胰腺導(dǎo)管干細(xì)胞系作為源自大鼠胰腺導(dǎo)管組織的成體干細(xì)胞模型，因具備胰腺干 / 祖細(xì)胞特性及多向分化潛能，在胰腺發(fā)育機(jī)制、胰島再生及糖尿病病理研究中具有重要價(jià)值，成為探究胰腺干細(xì)胞功能及相關(guān)疾病治療的關(guān)鍵實(shí)驗(yàn)工具。
細(xì)胞特性與來源背景：該細(xì)胞系源自大鼠胰腺導(dǎo)管上皮組織，經(jīng)膠原酶消化法分離并通過干細(xì)胞標(biāo)志物篩選獲得。細(xì)胞形態(tài)呈上皮樣，多為多邊形或短梭形，胞體飽滿，直徑約 15-20μm，胞質(zhì)均勻，可見細(xì)小顆粒，細(xì)胞核呈圓形或橢圓形，位于細(xì)胞中央，核仁清晰。生長(zhǎng)方式為貼壁生長(zhǎng)，呈鋪路石樣排列，傳代后 24 小時(shí)貼壁率達(dá) 90%。核心參數(shù)表現(xiàn)出胰腺導(dǎo)管干細(xì)胞特征：倍增時(shí)間約 72 小時(shí)，連續(xù)傳代 20 次后仍保持穩(wěn)定的干細(xì)胞特性；表面標(biāo)志物表達(dá)du特，細(xì)胞角蛋白 19（CK19）陽性率達(dá) 96%，胰腺十二指腸同源盒蛋白 1（PDX-1）陽性率 92%，干細(xì)胞標(biāo)志物 CD133 陽性率 88%，而胰島細(xì)胞標(biāo)志物胰島素（Insulin）、胰高血糖素（Glucagon）在基礎(chǔ)狀態(tài)下陽性率均低于 3%；具有正常的二倍體核型（染色體數(shù) 42 條），無染色體異常；無微生物污染，細(xì)胞純度達(dá) 95%，保障實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性。
科研應(yīng)用價(jià)值：在胰腺發(fā)育研究中，XMRPDSC2012 細(xì)胞經(jīng)成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子 10（FGF10）處理 7 天后，PDX-1 表達(dá)量增加 3.5 倍，胰芽樣結(jié)構(gòu)形成率達(dá) 45%，可模擬胚胎期胰腺導(dǎo)管的早期發(fā)育過程，為解析胰腺器官發(fā)生機(jī)制提供理想模型。
在胰島再生研究方面，該細(xì)胞在尼克酰胺聯(lián)合胰島分化培養(yǎng)基誘導(dǎo)下，14 天后胰島素陽性細(xì)胞率達(dá) 35%，胰高血糖素陽性細(xì)胞率達(dá) 20%，形成類胰島樣細(xì)胞團(tuán)，培養(yǎng)液中胰島素分泌量達(dá) 85μU/mL，且對(duì)葡萄糖刺激有明顯響應(yīng)，在高糖環(huán)境下胰島素釋放量是低糖環(huán)境的 2.8 倍，可用于探究胰島 β 細(xì)胞再生的分子機(jī)制。
糖尿病研究領(lǐng)域，將該細(xì)胞移植到糖尿病模型大鼠腎被膜下，4 周后大鼠空腹血糖水平下降 40%，血清胰島素水平提升 35%，移植部位形成功能性胰島樣結(jié)構(gòu)，成瘤率為 0，體現(xiàn)了其在糖尿病細(xì)胞治療中的應(yīng)用潛力。此外，該細(xì)胞在炎癥因子刺激下，白細(xì)胞介素 - 6（IL-6）分泌量增加 3.2 倍，可用于探究慢性胰腺炎中胰腺干細(xì)胞的損傷與修復(fù)機(jī)制。
培養(yǎng)與保存規(guī)范：推薦使用含 15% 胎牛血清的 DMEM/F12 混合培養(yǎng)基，添加 20ng/mL 表皮生長(zhǎng)因子（EGF）、10ng/mL 成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子 2（FGF2）及 1% 抗生素混合液，培養(yǎng)環(huán)境為 37℃、5% CO?飽和濕度培養(yǎng)箱。培養(yǎng)基需每 2-3 天更換一次，以維持干細(xì)胞特性。傳代時(shí)，用 PBS 沖洗細(xì)胞 2 次，加入適量細(xì)胞解離液（不含yi酶成分），37℃孵育 5-8 分鐘，待細(xì)胞間隙增大后輕輕吹打使細(xì)胞脫落，傳代比例為 1:2-1:3，每 5-7 天傳代一次，避免細(xì)胞過度密集影響干細(xì)胞特性。
凍存液采用培養(yǎng)基 + 10% DMSO+20% 胎牛血清的混合液，細(xì)胞濃度調(diào)整為 2×10?個(gè) /ml，經(jīng)程序降溫（-20℃1 小時(shí)→-80℃過夜→液氮保存）后，復(fù)蘇存活率達(dá) 85% 以上，3-4 代內(nèi)可恢復(fù)正常的生長(zhǎng)和分化能力。運(yùn)輸采用干冰冷凍運(yùn)輸或培養(yǎng)瓶活細(xì)胞運(yùn)輸，收到細(xì)胞后需靜置培養(yǎng) 24 小時(shí)，更換培養(yǎng)基后觀察細(xì)胞形態(tài)，確認(rèn)無異常漂浮物后進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。該細(xì)胞系僅限科研使用，操作需符合生物安全規(guī)范。
XMRPDSC2012 大鼠胰腺導(dǎo)管干細(xì)胞系以其穩(wěn)定的胰腺干細(xì)胞特性、*的分化潛能及良好的安全性，在胰腺生物學(xué)研究與糖尿病細(xì)胞治療探索中發(fā)揮著重要作用，為揭示胰腺發(fā)育機(jī)制和開發(fā)糖尿病新型治療策略提供了可靠的細(xì)胞平臺(tái)。
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