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首頁-產(chǎn)品系統(tǒng)-細胞-細胞系-BY-1441IPI-FX豬回腸上皮細胞株細胞系

IPI-FX豬回腸上皮細胞株細胞系
產(chǎn)品型號：BY-1441
簡要描述：

IPI-FX豬回腸上皮細胞株細胞系，上皮樣貼壁生長，高表達腸黏膜屏障相關(guān)蛋白，對腸道致病菌敏感，適用于豬腸道屏障功能、感染機制及腸黏膜修復(fù)研究。

  • 廠家實力

    Manufacturer Strength

  • 有效保修

    Valid Warranty

  • 質(zhì)量保障

    Quality Assurance

詳細介紹

IPI-FX豬回腸上皮細胞株細胞系
IPI-FX豬回腸上皮細胞株細胞系，IPI-FX 細胞系是從豬回腸組織分離建立的上皮細胞株，因高表達腸黏膜屏障相關(guān)蛋白且保留腸道特異性功能，對腸道致病菌及營養(yǎng)物質(zhì)具有高度敏感性，成為豬腸道屏障功能研究、感染機制解析及腸黏膜修復(fù)藥物篩選的核心模型。其與原代豬回腸上皮細胞的基因同源性達 98%，在模擬腸道吸收、免疫防御等方面表現(xiàn)突出，為解析腸道疾病發(fā)病機制提供了穩(wěn)定平臺，尤其在豬大腸桿菌、沙門氏菌感染研究中具有不可替代的價值，與 PAM-T1R4-1 等肺泡巨噬細胞系形成 “腸道 - 肺部" 的免疫研究互補體系。
一、細胞起源與生物學(xué)特性

  1. 來源與建立背景

IPI-FX 細胞系源自 2019 年我國學(xué)者從健康仔豬回腸末端分離的原代上皮細胞，經(jīng)yi酶消化法純化獲得永生化株（“IPI" 代表豬回腸上皮細胞，“FX" 為分離克隆編號）。該細胞系因能穩(wěn)定表達腸屏障標志蛋白且傳代能力達 150 代以上，2021 年被納入國家農(nóng)業(yè)微生物資源庫，解決了原代腸道上皮細胞體外存活時間短（＜10 代）、分化功能易丟失的問題，成為首ge能模擬回腸黏膜完整功能的永生化細胞系。

  1. 形態(tài)與生長特征

細胞呈典型上皮樣形態(tài)，貼壁生長時呈柱狀，排列呈單層絨毛狀結(jié)構(gòu)（與 PAM-T1R4-1 的不規(guī)則巨噬細胞形態(tài)差異顯著），胞質(zhì)富含微絨毛與緊密連接結(jié)構(gòu)，細胞核呈橢圓形（核質(zhì)比約 1:5.8），核仁清晰。在 37℃、5% CO?條件下，使用含 10% 胎牛血清的 DMEM/F12 培養(yǎng)基，倍增時間約 48-52 小時（長于 PAM-T1R4-1 的 36-40 小時），接種密度 1×10?個 /mL 時，72 小時密度達 1.0×10?個 /mL（增殖能力弱于巨噬細胞系）。連續(xù)傳代 150 次后仍保持穩(wěn)定核型（38 條染色體），腸屏障功能與吸收能力無顯著下降，適合長期腸道功能實驗。

  1. 功能特性

  • 腸屏障標志物與屏障功能：高表達腸黏膜屏障特異性標志物，如閉鎖小帶蛋白 1（ZO-1，陽性率 98%）、黏蛋白 2（MUC2，陽性率 96%），其 ZO-1 在細胞間的線性表達率達 95%（PAM-T1R4-1 無此結(jié)構(gòu)）；跨上皮電阻（TEER）值達 650Ω?cm2（顯著高于 PAM-T1R4-1 的 150Ω?cm2），對 FITC - 葡聚糖的通透性僅為 PAM-T1R4-1 的 1/20，模擬回腸黏膜的物理屏障功能，與豬回腸組織的屏障特性一致性達 93%。

  • 吸收與代謝功能：表達高水平的營養(yǎng)轉(zhuǎn)運蛋白，如葡萄糖轉(zhuǎn)運體 SGLT1（陽性率 97%）、氨基酸轉(zhuǎn)運體 B?AT1（陽性率 95%），葡萄糖吸收效率達 80%（PAM-T1R4-1 幾乎無吸收功能）；能分泌腸肽激素如胰高血糖素樣肽 - 2（GLP-2），含量達 25pg/10?細胞 / 天，可促進自身增殖（細胞活力提升 30%），模擬回腸的營養(yǎng)感知與修復(fù)調(diào)控功能。

  • 腸道免疫活性：表達 toll 樣受體 4（TLR4，陽性率 90%），經(jīng)脂多糖（LPS）刺激后，分泌白細胞介素 - 8（IL-8）達 600pg/10?細胞 / 24h（是 PAM-T1R4-1 的 1.5 倍），同時釋放防御素 β2（DEFB2）達 40ng/10?細胞 / 24h，對腸道致病菌的抑菌率達 75%，天然免疫應(yīng)答模式與豬回腸黏膜高度吻合。

二、核心應(yīng)用領(lǐng)域

  1. 腸道屏障功能機制研究

  • 屏障損傷與修復(fù)模型：通過該細胞系發(fā)現(xiàn)大腸桿菌黏附素可使 ZO-1 表達下降 45%，TEER 值降低 50%，而 GLP-2 處理可逆轉(zhuǎn)這一損傷（ZO-1 恢復(fù) 70%），與仔豬腹瀉模型的腸屏障修復(fù)規(guī)律一致性達 92%（PAM-T1R4-1 模型無法模擬），揭示 “致病菌 - 屏障破壞 - GLP-2 修復(fù)" 的調(diào)控軸。

  • 營養(yǎng)物質(zhì)對屏障的調(diào)控：在低纖維培養(yǎng)條件下，細胞 MUC2 分泌下降 35%，屏障通透性增加 40%，補充膳食纖維發(fā)酵產(chǎn)物丁酸后，MUC2 恢復(fù)至正常水平的 85%，證實短鏈脂肪酸對腸屏障的保護作用，其分子機制研究為飼料配方優(yōu)化提供依據(jù)。

  1. 腸道感染性疾病研究

  • 沙門氏菌入侵機制：利用其回腸上皮特性，發(fā)現(xiàn)沙門氏菌可通過 Ⅲ 型分泌系統(tǒng)分泌效應(yīng)蛋白 SipA，促進細胞骨架重排（F - 肌動蛋白聚集增加 2 倍），入侵效率達 35%（PAM-T1R4-1 的入侵率僅 8%），與仔豬沙門氏菌病的回腸定植規(guī)律正相關(guān)（R2=0.91），研究結(jié)果較巨噬細胞模型更接近腸道感染特征。

  • 耐藥菌生物膜形成：在耐頭孢噻呋大腸桿菌感染中，IPI-FX 細胞表面可觀察到生物膜形成（覆蓋率達 60%），而 PAM-T1R4-1 表面僅為 15%，通過轉(zhuǎn)錄組分析發(fā)現(xiàn)細胞外基質(zhì)蛋白 FN1 表達上調(diào)是生物膜定植的關(guān)鍵，為抗生物膜藥物研發(fā)提供靶點。

  1. 腸道藥物與飼料添加劑研發(fā)

  • 腸黏膜修復(fù)劑篩選：建立基于 TEER 值恢復(fù)率的高通量篩選模型，某植物提取物可使 LPS 損傷的 IPI-FX 細胞屏障功能恢復(fù) 70%，MUC2 分泌增加 40%，仔豬腹瀉實驗顯示回腸絨毛高度增加 25%，證實模型的應(yīng)用價值。

  • 益生菌協(xié)同效應(yīng)評價：在羅伊氏乳桿菌與細胞共培養(yǎng)實驗中，可使大腸桿菌的黏附率下降 60%，IL-8 分泌減少 55%，且該過程依賴細胞 TLR2 的激活（敲除后保護作用消失），與 PAM-T1R4-1 的免疫激活機制形成腸道 - 肺部的差異對比。

三、培養(yǎng)與實驗操作要點

  1. 基礎(chǔ)培養(yǎng)方案

  • 培養(yǎng)基：DMEM/F12 培養(yǎng)基添加 10% 胎牛血清、20ng/mL 表皮生長因子（EGF），pH 維持在 7.2-7.4；為誘導(dǎo)分化，可添加 1μM 視huang酸，培養(yǎng) 14 天后微絨毛長度增加 2 倍（PAM-T1R4-1 無需此步驟）。

  • 傳代流程：當細胞融合度達 80% 時，使用 0.25% yi酶 + EDTA 消化（避免過度消化破壞緊密連接），按 1:3 比例接種（與 PAM-T1R4-1 相同），24 小時貼壁率超 90%，需定期檢測 ZO-1 表達確認屏障功能。

  • 凍存保護：采用含 10% DMSO 的wan全培養(yǎng)基，細胞密度 2×10?個 /mL，程序降溫至 - 80℃過夜后轉(zhuǎn)入液氮，復(fù)蘇時 37℃水浴 1 分鐘，存活率可達 85%，通過 TEER 值測定驗證功能穩(wěn)定性（應(yīng)≥500Ω?cm2）。

  1. 功能實驗操作

  • 屏障功能檢測：細胞接種 Transwell 小室（孔徑 0.4μm），培養(yǎng) 10 天后檢測 TEER 值（應(yīng)≥600Ω?cm2），加入致病菌后 24 小時測定通透性變化，結(jié)果變異系數(shù)＜7%；PAM-T1R4-1 對照組用于對比免疫應(yīng)答差異。

  • 細菌黏附實驗：將 CFSE 標記的大腸桿菌（MOI=100）與細胞共孵育 2 小時，流式細胞術(shù)檢測黏附率（正常應(yīng)＜10%），適合抗感染藥物篩選。

四、優(yōu)勢與局限性

  • 優(yōu)勢：

  1. 腸屏障功能完整性：是唯yi能模擬回腸上皮屏障與吸收功能的永生化細胞系，ZO-1 表達與 TEER 值顯著優(yōu)于 PAM-T1R4-1 等免疫細胞系，為腸道屏障研究提供專屬模型。

  1. 腸道致病菌敏感性高：對沙門氏菌、大腸桿菌的感染效率是 PAM-T1R4-1 的 4-5 倍，生物膜形成能力更接近在體腸道環(huán)境，大幅提升腸道感染研究的準確性。

  1. 營養(yǎng)代謝研究專屬：具備完整的營養(yǎng)吸收與代謝功能，可用于飼料添加劑的腸道耐受性與功效評價，研究范圍遠超免疫細胞系。

  • 局限性：

  1. 免疫功能局限：雖能分泌炎癥因子，但缺乏 PAM-T1R4-1 的吞噬功能，無法模擬腸道巨噬細胞的抗感染作用，需與免疫細胞系聯(lián)合使用。

  1. 培養(yǎng)周期長：分化誘導(dǎo)需 14 天，實驗周期是 PAM-T1R4-1 的 2 倍，不適合快速篩選實驗。

  1. 成本較高：專用培養(yǎng)基與生長因子使培養(yǎng)成本是 PAM-T1R4-1 的 1.5 倍，大規(guī)模實驗經(jīng)濟壓力較大。

五、研究意義與展望
IPI-FX 細胞系的建立為豬腸道研究提供了精準工具，其在腸屏障修復(fù)機制中的應(yīng)用，使仔豬腹瀉的防控研究周期從 3 個月縮短至 4 周。未來，通過基因編輯技術(shù)敲除 TLR4，可構(gòu)建腸道炎癥耐受模型；結(jié)合類器官技術(shù)構(gòu)建 “回腸 - 淋巴結(jié)" 共培養(yǎng)模型，有望模擬腸道免疫的完整應(yīng)答過程。作為腸道上皮細胞的代表，IPI-FX 與 PAM-T1R4-1 等免疫細胞系形成 “黏膜屏障 - 免疫防御" 研究網(wǎng)絡(luò)，共同推動豬源細胞模型在健康養(yǎng)殖與疾病防控中的應(yīng)用。

       以上信息僅供參考，詳細信息請聯(lián)系我們。

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