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CHL中國倉鼠肺細胞系
產(chǎn)品型號:BY-1366
簡要描述:

CHL中國倉鼠肺細胞系,成纖維樣,貼壁生長,染色體核型穩(wěn)定,對遺傳毒性物質(zhì)敏感,適用于染色體畸變分析、環(huán)境污染物致突變性研究及細胞毒性測試。

  • 廠家實力

    Manufacturer Strength
  • 有效保修

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  • 質(zhì)量保障

    Quality Assurance

詳細介紹

CHL中國倉鼠肺細胞系
CHL中國倉鼠肺細胞系是源自中國倉鼠肺組織的永生化細胞模型,因成纖維樣形態(tài)典型、染色體核型穩(wěn)定且遺傳毒性響應(yīng)敏感,成為遺傳毒性評估、環(huán)境污染物檢測及細胞生物學(xué)研究的經(jīng)典工具。其保留肺成纖維細胞固有特征,兼具永生化細胞的傳代穩(wěn)定性,為體外毒性測試與染色體分析提供了標準化平臺。
一、細胞來源與基本特性
  • 來源與永生化:該細胞系源自中國倉鼠胚胎肺組織,經(jīng)原代分離與連續(xù)傳代獲得。原代細胞通過組織塊培養(yǎng)法獲取,經(jīng) 30 代傳代篩選出增殖穩(wěn)定的克隆,命名為 CHL(Chinese Hamster Lung 縮寫)。永生化過程未引入外源基因,僅通過體外培養(yǎng)壓力自然篩選,全基因組測序顯示與原代細胞遺傳相似度>98%,核型分析證實染色體數(shù)目穩(wěn)定(2n=22),無顯著核型異常。

  • 形態(tài)與增殖:體外培養(yǎng)呈典型成纖維樣,貼壁生長時呈長梭形,胞質(zhì)伸展明顯,排列呈放射狀或漩渦狀;懸浮培養(yǎng)適應(yīng)性差,以貼壁生長為主。37℃、5% CO?條件下,增殖周期約 28-32 小時,適應(yīng)含 10% 胎牛血清的 MEM 培養(yǎng)基,傳代 100 次以上生長速率衰減<7%,染色體畸變率<1%,凍存復(fù)蘇后存活率超 86%。

  • 功能特征:核心優(yōu)勢在于染色體穩(wěn)定性與毒性敏感性:核型顯示染色體大小均一、著絲粒清晰,便于觀察斷裂、易位等畸變;對遺傳毒性物質(zhì)(如烷化劑、紫外線)響應(yīng)靈敏,陽性對照物(如絲裂mei素 C)可誘導(dǎo)畸變率提升 8-12 倍,背景畸變率<0.5%,符合 OECD 473 測試指南。同時,膠原蛋白 Ⅰ 型分泌量達總蛋白 12%-15%,保留成纖維細胞基質(zhì)合成功能。

二、核心應(yīng)用領(lǐng)域
  1. 遺傳毒性與致突變性測試

作為染色體畸變試驗的標gan模型,廣泛用于化學(xué)品、藥品及環(huán)境污染物的遺傳毒性評估。在 OECD 473 標準測試中,經(jīng)受試物處理后,可直接觀察染色體畸變類型與頻率,對已知誘變劑檢測靈敏度達 100%,結(jié)果重現(xiàn)性誤差<5%。在環(huán)境檢測中,能區(qū)分重金屬(如鎘、鉻)的劑量依賴性致突變效應(yīng)(IC50 差異精確至 1μM 級別),為土壤與水體污染風(fēng)險評估提供數(shù)據(jù);在新藥研發(fā)中,可快速排除具染色體損傷潛力的候選物,降低臨床前風(fēng)險。
  1. 細胞毒性與增殖抑制分析

因增殖特性穩(wěn)定,成為細胞毒性測試常用模型。通過 MTT 法或 CCK-8 法量化評估物質(zhì)毒性(如 IC50 值),對相關(guān)藥物的敏感性與腫瘤細胞相關(guān)性達 85% 以上。在納米材料評估中,能反映不同粒徑顆粒的攝取差異(50nm 顆粒毒性較 100nm 高 30%),通過 LDH 釋放實驗監(jiān)測細胞膜損傷,為納米生物安全性提供依據(jù)。
  1. 成纖維細胞功能研究

可用于肺成纖維細胞生理功能研究。在纖維化模型中,經(jīng) TGF-β 處理后,α-SMA 表達上調(diào) 3.5 倍,膠原蛋白合成增加 40%,模擬肺纖維化表型;傷口愈合實驗中,遷移速率達 0.8mm/24h,對 PDGF 響應(yīng)顯著(遷移速率提升 60%),為創(chuàng)傷修復(fù)機制研究提供模型。
三、培養(yǎng)方法
  • 貼壁培養(yǎng)操作

  1. 復(fù)蘇:凍存管 37℃水浴解凍,轉(zhuǎn)移至含 10mL 預(yù)熱培養(yǎng)基(MEM+10% 胎牛血清)的離心管,1000rpm 離心 5 分鐘,接種至 T75 瓶,37℃、5% CO?培養(yǎng),24 小時貼壁率超 90%。

  1. 換液:接種 48 小時后首ci換液,去除未貼壁細胞與代謝廢物,此后每 3 天換液一次,維持 pH 7.2-7.4(酚紅呈橙紅色)。

  1. 傳代:融合度達 80%-90% 時,棄培養(yǎng)基,PBS 清洗 2 次,加 2mL 細胞解離液,37℃孵育 2-3 分鐘,鏡檢細胞脫落后加 8mL 培養(yǎng)基終止,按 1:4 傳代,避免過度融合。

  • 染色體畸變測試流程

  1. 細胞準備:對數(shù)期細胞以 5×10?個 / 孔接種 6 孔板,培養(yǎng) 24 小時同步化。

  1. 受試物處理:加不同濃度受試物,設(shè)陰性對照(溶劑)與陽性對照(絲裂mei素 C 0.1μg/mL),培養(yǎng) 24-48 小時(依代謝特性調(diào)整)。

  1. 制片觀察:收獲前 4 小時加秋水仙素(0.1μg/mL),細胞經(jīng)低滲(0.075M KCl)、固定(甲醇:冰醋酸 = 3:1)后制片,Giemsa 染色,每樣本觀察 100 個中期分裂相,統(tǒng)計畸變率。

  • 凍存流程:對數(shù)期細胞 1000rpm 離心 5 分鐘,凍存液(70% MEM+20% 胎牛血清 + 10% DMSO)重懸至 5×10?個 /mL,分裝凍存管,程序降溫盒 - 80℃過夜后移至液氮,保存期超 5 年,復(fù)蘇后傳代 2 次恢復(fù)狀態(tài)。

四、優(yōu)勢與局限性
  • 優(yōu)勢:成纖維樣形態(tài)典型,易觀察;染色體核型穩(wěn)定(2n=22),畸變分析準確;對遺傳毒性物質(zhì)敏感,符合國際標準;傳代穩(wěn)定,100 代內(nèi)特性無顯著改變;培養(yǎng)簡便,成本低于腫瘤細胞系。

  • 局限性:成纖維細胞特性限制上皮細胞相關(guān)研究;對部分脂溶性受試物吸收差(需助溶劑);傳代>120 次可能出現(xiàn)核型漂移(畸變率升至 2%-3%),需定期純化。

五、研究意義

CHL 細胞系為遺傳毒性評估提供了標準化工具,其穩(wěn)定核型與敏感響應(yīng)推動了化學(xué)品安全評價體系發(fā)展?;A(chǔ)研究中,助力闡明成纖維細胞增殖調(diào)控與染色體穩(wěn)定性機制;應(yīng)用領(lǐng)域,作為國際認可模型支撐數(shù)千種化學(xué)品、藥品的安全性評估,尤其在環(huán)境污染物監(jiān)測與新藥早期篩選中作用關(guān)鍵,是連接實驗室檢測與實際風(fēng)險評估的重要橋梁。

以上信息僅供參考,詳細信息請聯(lián)系我們。

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