人肝竇內(nèi)皮細(xì)胞

檢測原理

產(chǎn)品特點

• 純度高：細(xì)胞純度≥95%，經(jīng)形態(tài)學(xué)鑒定、免疫組化染色及微生物檢測（細(xì)菌、真菌、支原體、病毒），均無雜細(xì)胞及微生物污染，可直接用于實驗，能有效保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性和重復(fù)性；

• 生物學(xué)特性穩(wěn)定：細(xì)胞貼壁性好、增殖能力穩(wěn)定，原代細(xì)胞可傳代3-5代，永生化細(xì)胞系連續(xù)傳代15-20代后，仍能保持其典型形態(tài)、特異性標(biāo)志物表達及生理功能，無明顯變異，實驗重復(fù)性強；

• 功能完整性：保留其核心生理功能，可穩(wěn)定分泌血管活性物質(zhì)，具有良好的物質(zhì)轉(zhuǎn)運、血管調(diào)控及免疫介導(dǎo)能力，能真實模擬體內(nèi)的生理功能及病理過程，實驗結(jié)果具有良好的生理相關(guān)性；

• 操作便捷：采用標(biāo)準(zhǔn)化培養(yǎng)體系，解凍后可快速復(fù)蘇（復(fù)蘇存活率≥85%），培養(yǎng)條件溫和（常規(guī)37℃、5% CO?培養(yǎng)），無需特殊試劑及復(fù)雜操作，適合常規(guī)實驗室培養(yǎng)與操作，降低實驗門檻，同時可參考標(biāo)準(zhǔn)化細(xì)胞培養(yǎng)流程進行復(fù)蘇、傳代操作；

• 適用性廣：可用于多種科研場景，包括肝臟微循環(huán)研究、肝臟損傷修復(fù)機制探究、肝臟相關(guān)疾?。ㄈ绺卫w維化、肝硬化、肝癌）模型構(gòu)建、保肝及抗肝纖維化藥物篩選、血管生物學(xué)研究等，滿足不同科研需求，同時可用于細(xì)胞共培養(yǎng)、細(xì)胞凍存與復(fù)蘇相關(guān)實驗等場景。

適用樣本類型

• 細(xì)胞生物學(xué)實驗：包括細(xì)胞增殖、凋亡、周期、黏附及血管活性物質(zhì)分泌等基礎(chǔ)實驗，用于研究其生物學(xué)行為及功能特性，可開展細(xì)胞消化、傳代、凍存等相關(guān)操作優(yōu)化實驗；

• 藥物篩選與藥效評估：用于保肝藥物、抗肝纖維化藥物、血管活性藥物的體外篩選，檢測藥物對細(xì)胞增殖、凋亡及血管活性物質(zhì)分泌的影響，評估藥物療效，為肝臟相關(guān)疾病的藥物研發(fā)提供支撐；

• 分子生物學(xué)實驗：用于肝臟相關(guān)基因、蛋白（如CD31、vWF、內(nèi)皮素）表達檢測，如RT-PCR、Western blot、免疫組化等實驗，探究其在肝病發(fā)病、損傷修復(fù)中的分子機制，為肝臟相關(guān)疾病的診治研究提供新思路；

• 臨床相關(guān)研究：用于模擬肝纖維化、肝硬化、肝癌等疾病的細(xì)胞模型，為疾病發(fā)病機制研究、臨床診斷標(biāo)志物篩選、治療方案優(yōu)化提供體外實驗支撐，可模擬其在疾病狀態(tài)下的功能異常及修復(fù)過程；

• 其他：可用于細(xì)胞共培養(yǎng)（如與肝細(xì)胞、肝巨噬細(xì)胞共培養(yǎng)）、肝臟微環(huán)境構(gòu)建、細(xì)胞凍存與復(fù)蘇相關(guān)實驗等科研場景，具體應(yīng)用可結(jié)合實驗需求調(diào)整，同時可用于驗證玻璃化凍存等新型凍存技術(shù)對肝竇內(nèi)皮細(xì)胞的影響。

儲存與注意事項

（一）儲存條件

• 凍存細(xì)胞：置于-196℃液氮中長期儲存，優(yōu)先選擇處于對數(shù)生長期的細(xì)胞進行凍存，凍存時需使用含20%FBS、10%DMSO的專用凍存液，儲存時需確保液氮液位穩(wěn)定，避免細(xì)胞反復(fù)凍融（凍融次數(shù)≤3次），否則會導(dǎo)致細(xì)胞活性下降、死亡或生物學(xué)特性改變，凍存后可在半年后復(fù)蘇檢測細(xì)胞存活率，確保細(xì)胞狀態(tài)良好，凍存細(xì)胞不宜長期存儲在-80℃環(huán)境中，應(yīng)盡快轉(zhuǎn)移至液氮罐中；

• 復(fù)蘇后細(xì)胞：復(fù)蘇后的細(xì)胞需立即放入37℃水浴鍋中快速晃動融化（時間控制在1分鐘內(nèi)），以1000r/min的速度離心5分鐘，去除凍存液中的DMSO后，接種至含wan全培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中，置于37℃、5% CO?、飽和濕度的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，24-48小時后更換培養(yǎng)基，去除死細(xì)胞，新復(fù)蘇細(xì)胞24小時內(nèi)避免頻繁觀察和更換培養(yǎng)基，防止影響細(xì)胞貼壁，將培養(yǎng)瓶放入培養(yǎng)箱時，可輕輕旋松瓶蓋以保證氣體充分交換（若使用透氣性瓶蓋則無需旋松）；

• 培養(yǎng)基儲存：配套wan全培養(yǎng)基需置于4℃冷藏儲存，避免高溫、強光直射，儲存期限不超過1個月，使用前需恢復(fù)至室溫并輕輕搖勻，解凍血清時需逐步解凍，避免快速變溫，防止產(chǎn)生血清沉淀物，血清中出現(xiàn)的纖維蛋白、磷酸鈣等沉淀物不影響細(xì)胞生長，可通過離心去除，除非必要，避免對血清進行熱滅活處理；

• 運輸條件：細(xì)胞運輸采用干冰低溫運輸（-80℃），運輸過程中需做好防震、防潮措施，避免溫度波動，運輸時間不超過72小時，接收后立即放入對應(yīng)儲存環(huán)境，若無法立即儲存，可在干冰上暫時保存，避免常溫放置過久。

（二）注意事項

• 本產(chǎn)品僅用于科研，嚴(yán)禁用于臨床診斷、治療或其他非科研用途，嚴(yán)禁直接接觸人體或用于人體相關(guān)實驗，實驗過程中需嚴(yán)格遵循動物實驗相關(guān)倫理要求，未預(yù)約者不得進行細(xì)胞實驗；

• 細(xì)胞復(fù)蘇、培養(yǎng)、傳代需嚴(yán)格遵循無菌操作原則，實驗環(huán)境需符合細(xì)胞培養(yǎng)要求，實驗器具需經(jīng)紫外燈照射30分鐘和通風(fēng)30分鐘后使用，操作前需用75%酒精對器具進行消毒，避免微生物污染；傳代時需控制消化時間，當(dāng)細(xì)胞明顯變圓、細(xì)胞間隙增大并呈現(xiàn)流沙狀時停止消化，不同細(xì)胞消化時間可根據(jù)細(xì)胞特性調(diào)整，每隔30秒觀察一次細(xì)胞狀態(tài)，避免過度消化損傷細(xì)胞，貼壁細(xì)胞傳代前需用5mL PBS輕輕潤洗細(xì)胞，避免沖擊細(xì)胞層，潤洗后吸去PBS再進行消化操作；

• 細(xì)胞培養(yǎng)過程中，需定期觀察細(xì)胞形態(tài)、生長狀態(tài)，若培養(yǎng)基出現(xiàn)偏紫，多為CO?溢出導(dǎo)致堿性增加，可輕輕旋松瓶蓋放入培養(yǎng)箱校正，變紫培養(yǎng)基可繼續(xù)使用；若培養(yǎng)液變黃或變濁，可能是細(xì)胞密度過高或細(xì)菌污染，需及時消化傳代或丟棄處理；若發(fā)現(xiàn)真菌或霉菌污染，需用紫外燈照射培養(yǎng)箱去除孢子，并進行消毒；

• 處理細(xì)胞支原體污染時，建議優(yōu)先更換新的細(xì)胞株，若細(xì)胞珍貴，可嘗試使用四環(huán)素、大環(huán)內(nèi)酯類抗生素等進行治療，支原體污染易復(fù)發(fā)，需做好后續(xù)監(jiān)測；

• 細(xì)胞換液時機可根據(jù)細(xì)胞狀態(tài)調(diào)整，傳代后隔天或隔兩天換液為宜，若死細(xì)胞較多可第二天換液，生長速度較慢的細(xì)胞可減少換液次數(shù)，細(xì)胞分布不均時可消化重鋪；

• 凍存細(xì)胞時，需將細(xì)胞懸液以1000-1200r/min離心3-5分鐘，丟棄上清液后用預(yù)冷的凍存液重懸細(xì)胞，細(xì)胞密度控制在1×10?~1×10?個/ml，分裝后標(biāo)記細(xì)胞種類、凍存時間及操作人員，放入程序降溫盒置于-80℃過夜后，再轉(zhuǎn)移至液氮中長期儲存；

• 取出液氮罐中的細(xì)胞時，務(wù)必加強個人防護，避免凍傷；取材及細(xì)胞操作時動作要輕，避免牽拉和擠壓造成細(xì)胞機械損傷，切忌用水直接沖洗細(xì)胞，可用0.1M PBS輕輕沖洗；

• 實驗過程中產(chǎn)生的細(xì)胞廢液、廢棄培養(yǎng)基及用過的培養(yǎng)耗材，需經(jīng)滅菌處理后再丟棄，避免生物污染；操作人員需穿戴無菌手套、口罩、實驗服，做好個人防護，實驗結(jié)束后及時消毒實驗臺面。

訂購信息

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