人卵巢表層上皮細胞

檢測原理

產(chǎn)品特點

• 純度高：細胞純度≥95%，經(jīng)形態(tài)學鑒定、免疫組化染色及微生物檢測（細菌、真菌、支原體、病毒），均無雜細胞及微生物污染，可直接用于實驗，能有效保證實驗結(jié)果的準確性和重復性，契合婦產(chǎn)科學及生殖醫(yī)學科研的嚴格要求；

• 生物學特性穩(wěn)定：細胞活性良好，在體外可穩(wěn)定培養(yǎng)5-7天，培養(yǎng)過程中形態(tài)及生理功能無明顯退變，實驗重復性強，可穩(wěn)定表達卵巢表層上皮細胞特異性標志物，能正常響應(yīng)激素信號及損傷修復相關(guān)通路，經(jīng)短期傳代后仍能保持良好的細胞活性，符合短期科研實驗的需求，部分細胞可保留Procr陽性干細胞相關(guān)特性，具有一定的損傷修復潛能；

• 功能完整性：保留該細胞的核心功能，具有良好的貼壁生長能力和激素響應(yīng)能力，可參與損傷修復相關(guān)過程，能正常表達HE4、CA125等與卵巢疾病相關(guān)的標志物，真實模擬人體內(nèi)該細胞的生理特性，實驗結(jié)果具有良好的臨床相關(guān)性，可用于卵巢上皮性腫瘤發(fā)病機制的初步探究；

• 操作便捷：采用人體上皮細胞專用標準化培養(yǎng)體系，解凍后可快速復蘇（復蘇存活率≥85%），培養(yǎng)條件溫和（常規(guī)37℃、5% CO?培養(yǎng)），無需特殊試劑及復雜操作，適合常規(guī)實驗室培養(yǎng)與操作，降低實驗門檻，可參考標準化人體原代上皮細胞培養(yǎng)流程進行復蘇、培養(yǎng)及功能學實驗操作；

• 適用性廣：可用于多種科研場景，包括卵巢生理功能研究、卵巢表層上皮細胞損傷修復機制探究、卵巢上皮性腫瘤發(fā)病機制研究、婦科疾病診斷標志物篩選、激素調(diào)控研究及相關(guān)藥物篩選與藥效評估等，滿足不同科研需求，同時可用于卵巢組織類器官構(gòu)建、細胞共培養(yǎng)等場景，為卵巢相關(guān)科研及臨床轉(zhuǎn)化提供可靠的細胞模型，也可用于生育力保護相關(guān)基礎(chǔ)研究。

適用樣本類型

• 細胞生物學實驗：包括細胞增殖、凋亡、損傷修復及激素響應(yīng)等基礎(chǔ)實驗，用于研究其生物學行為及生理功能，可開展細胞培養(yǎng)條件優(yōu)化、激素調(diào)控機制、損傷修復相關(guān)信號通路等相關(guān)實驗，同時可用于卵巢上皮干細胞相關(guān)特性研究，為卵巢生理機制研究提供支撐；

• 婦科疾病相關(guān)研究：用于卵巢上皮性腫瘤發(fā)病機制探究，可作為體外模型模擬卵巢上皮細胞的異常增殖及惡變過程，結(jié)合HE4、CA125等標志物檢測，探究腫瘤發(fā)生發(fā)展的分子機制，同時可用于卵巢功能障礙相關(guān)研究，為婦科疾病的診治提供新思路；

• 藥物篩選與藥效評估：用于婦科疾病相關(guān)藥物（如卵巢癌預防藥物、激素調(diào)節(jié)藥物）的體外篩選，檢測藥物對細胞活性、激素響應(yīng)及標志物表達的影響，評估藥物療效及安全性，為婦科藥物研發(fā)提供支撐，同時可用于藥物對卵巢上皮細胞損傷修復的調(diào)控研究；

• 分子生物學實驗：用于卵巢表層上皮細胞相關(guān)基因、蛋白表達檢測，如RT-PCR、Western blot、免疫組化等實驗，探究激素調(diào)控、損傷修復及腫瘤相關(guān)分子機制，同時可用于HE4、CA125等標志物的表達調(diào)控研究，為卵巢疾病診斷提供技術(shù)支撐；

• 其他：可用于卵巢組織類器官構(gòu)建、細胞共培養(yǎng)、生育力保護相關(guān)基礎(chǔ)實驗等科研場景，具體應(yīng)用可結(jié)合實驗需求調(diào)整，同時可用于驗證新型培養(yǎng)技術(shù)對細胞活性及功能的影響，建議在細胞培養(yǎng)5-7天內(nèi)開展核心實驗，確保細胞功能穩(wěn)定，可參考玻璃化凍存相關(guān)技術(shù)開展細胞長期保存研究。

儲存與注意事項

（一）儲存條件

• 復蘇后細胞：復蘇后的細胞需立即放入37℃水浴鍋中快速晃動融化（時間控制在1分鐘內(nèi)），以800-1000r/min的速度離心5分鐘，去除凍存液中的DMSO后，接種至含專用wan全培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中，置于37℃、5% CO?、飽和濕度的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，24-48小時后更換培養(yǎng)基，去除死細胞及未貼壁細胞，新復蘇細胞24小時內(nèi)避免頻繁觀察和更換培養(yǎng)基，防止影響細胞貼壁及增殖，將培養(yǎng)瓶放入培養(yǎng)箱時，可輕輕旋松瓶蓋以保證氣體充分交換（若使用透氣性瓶蓋則無需旋松）；

• 培養(yǎng)基儲存：配套專用wan全培養(yǎng)基需置于4℃冷藏儲存，避免高溫、強光直射，儲存期限不超過1個月，使用前需恢復至室溫并輕輕搖勻，解凍血清時需逐步解凍，避免快速變溫，防止產(chǎn)生血清沉淀物，血清中出現(xiàn)的纖維蛋白、磷酸鈣等沉淀物不影響細胞生長，可通過離心去除，培養(yǎng)基中需添加新鮮上皮細胞生長因子及適量激素，現(xiàn)配現(xiàn)用，避免生長因子及激素失活；

• 凍存細胞：置于-196℃液氮中長期儲存，優(yōu)先選擇處于對數(shù)生長期、活性穩(wěn)定的細胞進行凍存，凍存時需使用人體上皮細胞專用凍存液（含20%FBS、10%DMSO、5%上皮細胞生長因子），可采用玻璃化凍存法減少細胞損傷，儲存時需確保液氮液位穩(wěn)定，避免細胞反復凍融（凍融次數(shù)≤3次），否則會導致細胞活性下降、功能異?；蛩劳?，凍存后可在半年后復蘇檢測細胞存活率，確保細胞狀態(tài)良好，凍存細胞不宜長期存儲在-80℃環(huán)境中，應(yīng)盡快轉(zhuǎn)移至液氮罐中；

• 運輸條件：細胞運輸采用干冰低溫運輸（-80℃），運輸過程中需做好防震、防潮措施，避免溫度波動，運輸時間不超過72小時，接收后立即放入對應(yīng)儲存環(huán)境，若無法立即儲存，可在干冰上暫時保存，避免常溫放置過久，運輸過程中需做好細胞標識，防止混淆，運輸前可適當調(diào)整細胞密度，確保復蘇后存活率，卵巢組織相關(guān)細胞運輸可參考4-8℃恒溫轉(zhuǎn)運相關(guān)規(guī)范。

（二）注意事項

• 本產(chǎn)品僅用于科研，嚴禁用于臨床診斷、治療或其他非科研用途，嚴禁直接接觸人體或用于人體相關(guān)實驗，實驗過程中需嚴格遵循人體細胞實驗相關(guān)倫理要求，未預約者不得進行細胞實驗，細胞取材及使用需符合倫理規(guī)范；

• 處理細胞支原體污染時，建議優(yōu)先更換新的細胞株，若細胞珍貴，可嘗試使用支原體清除試劑進行治療，支原體污染易復發(fā)，需做好后續(xù)監(jiān)測，支原體污染會影響細胞增殖、激素響應(yīng)及標志物表達，需嚴格控制；

• 細胞復蘇、培養(yǎng)、傳代需嚴格遵循無菌操作原則，實驗環(huán)境需符合細胞培養(yǎng)要求，實驗器具需經(jīng)紫外燈照射30分鐘和通風30分鐘后使用，操作前需用75%酒精對器具進行消毒，避免微生物污染；該細胞為貼壁生長細胞，傳代時可采用溫和消化方式，避免過度消化損傷細胞，傳代比例建議為1:2-1:3，確保細胞增殖空間，傳代過程中需避免細胞聚團過多，可利用流式分選方法優(yōu)化細胞純度；

• 細胞培養(yǎng)過程中，需定期觀察細胞形態(tài)、生長狀態(tài)及激素響應(yīng)情況，若培養(yǎng)基出現(xiàn)異常顏色，多為CO?溢出或細胞代謝異常導致，可輕輕旋松瓶蓋放入培養(yǎng)箱校正，異常顏色培養(yǎng)基可根據(jù)細胞狀態(tài)判斷是否繼續(xù)使用；若培養(yǎng)液變黃或變濁，可能是細胞密度過高或細菌污染，需及時傳代或丟棄處理；若發(fā)現(xiàn)真菌或霉菌污染，需用紫外燈照射培養(yǎng)箱去除孢子，并進行消毒；培養(yǎng)過程中避免劇烈晃動培養(yǎng)瓶，防止細胞脫落影響生長，培養(yǎng)體系中需嚴格控制激素濃度，避免影響細胞生理功能；

• 細胞換液時機可根據(jù)細胞狀態(tài)調(diào)整，復蘇后隔天更換一次培養(yǎng)基，后續(xù)每2-3天更換一次，換液時動作輕柔，緩慢加入培養(yǎng)基，避免沖擊細胞，換液量為培養(yǎng)基總量的1/2-2/3，避免wan全更換培養(yǎng)基導致營養(yǎng)成分驟變，影響細胞增殖及功能，換液時可收集上清液用于HE4、CA125等標志物檢測；

• 凍存細胞時，需將細胞懸液以800-1000r/min離心3-5分鐘，丟棄上清液后用預冷的人體上皮細胞專用凍存液重懸細胞，細胞密度控制在1×10?~1×10?個/ml，分裝后標記細胞種類、凍存時間及操作人員，放入程序降溫盒置于-80℃過夜后，再轉(zhuǎn)移至液氮中長期儲存，建立細胞凍存臺賬，便于追溯，凍存前可檢測細胞活性及標志物表達，確保凍存細胞功能穩(wěn)定；

• 取出液氮罐中的細胞時，務(wù)必加強個人防護，避免凍傷；取材及細胞操作時動作要輕，避免牽拉和擠壓造成細胞機械損傷，切忌用水直接沖洗細胞，可用0.1M PBS輕輕沖洗，避免影響細胞活性及激素響應(yīng)功能；

• 實驗過程中產(chǎn)生的細胞廢液、廢棄培養(yǎng)基及用過的培養(yǎng)耗材，需經(jīng)滅菌處理后再丟棄，避免生物污染；操作人員需穿戴無菌手套、口罩、實驗服，做好個人防護，實驗結(jié)束后及時消毒實驗臺面，實驗廢棄物需按生物安全規(guī)范處理，含激素及標志物檢測相關(guān)廢液需單獨收集處理，避免交叉污染。

訂購信息

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