Burkitts人淋巴瘤細(xì)胞系

檢測(cè)原理

產(chǎn)品特點(diǎn)

• 純度高：細(xì)胞純度≥95%，經(jīng)形態(tài)學(xué)鑒定、免疫組化染色及微生物檢測(cè)（細(xì)菌、真菌、支原體、病毒），均無(wú)雜細(xì)胞及微生物污染，可直接用于實(shí)驗(yàn)，能有效保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和重復(fù)性，契合腫瘤學(xué)及免疫學(xué)科研的嚴(yán)格要求；

• 生物學(xué)特性穩(wěn)定：細(xì)胞增殖能力強(qiáng)，可連續(xù)傳代培養(yǎng)，傳代過(guò)程中形態(tài)及病理功能無(wú)明顯退變，實(shí)驗(yàn)重復(fù)性強(qiáng)，可穩(wěn)定表達(dá)B淋巴細(xì)胞及淋巴瘤特異性標(biāo)志物，c-myc基因表達(dá)穩(wěn)定，經(jīng)多次傳代后仍能保持良好的細(xì)胞活性及腫瘤特性，符合長(zhǎng)期科研實(shí)驗(yàn)的需求；

• 功能完整性：保留該細(xì)胞系的核心功能，具有良好的懸浮生長(zhǎng)能力和腫瘤增殖、侵襲特性，可正常響應(yīng)hua療藥物、靶向藥物的干預(yù)，能穩(wěn)定表達(dá)淋巴瘤相關(guān)異常蛋白，真實(shí)模擬人體內(nèi)Burkitts淋巴瘤細(xì)胞的病理特性，實(shí)驗(yàn)結(jié)果具有良好的臨床相關(guān)性，可用于淋巴瘤發(fā)病機(jī)制的深入探究；

• 操作便捷：采用淋巴瘤細(xì)胞專用標(biāo)準(zhǔn)化培養(yǎng)體系，解凍后可快速?gòu)?fù)蘇（復(fù)蘇存活率≥85%），培養(yǎng)條件溫和（常規(guī)37℃、5% CO?培養(yǎng)），無(wú)需特殊試劑及復(fù)雜操作，適合常規(guī)實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)與操作，降低實(shí)驗(yàn)門(mén)檻，可參考標(biāo)準(zhǔn)化腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)流程進(jìn)行復(fù)蘇、傳代及功能學(xué)實(shí)驗(yàn)操作；

• 適用性廣：可用于多種科研場(chǎng)景，包括Burkitts淋巴瘤發(fā)病機(jī)制探究、腫瘤細(xì)胞增殖與凋亡機(jī)制研究、抗淋巴瘤藥物篩選與藥效評(píng)估、c-myc基因功能驗(yàn)證、淋巴瘤診斷標(biāo)志物篩選等，滿足不同科研需求，同時(shí)可用于腫瘤細(xì)胞共培養(yǎng)、藥物耐藥機(jī)制研究等場(chǎng)景，為Burkitts淋巴瘤相關(guān)科研及臨床轉(zhuǎn)化提供可靠的細(xì)胞模型。

適用樣本類型

• 細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)：包括細(xì)胞增殖、凋亡、侵襲及傳代規(guī)律等基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)，用于研究其生物學(xué)行為及腫瘤特性，可開(kāi)展細(xì)胞培養(yǎng)條件優(yōu)化、增殖調(diào)控機(jī)制、凋亡信號(hào)通路等相關(guān)實(shí)驗(yàn)，同時(shí)可用于腫瘤細(xì)胞耐藥機(jī)制研究，為淋巴瘤治療研究提供支撐；

• 腫瘤學(xué)相關(guān)研究：用于Burkitts淋巴瘤發(fā)病機(jī)制探究，可作為體外模型模擬淋巴瘤細(xì)胞的異常增殖、侵襲及惡變過(guò)程，結(jié)合c-myc基因及相關(guān)蛋白檢測(cè)，探究腫瘤發(fā)生發(fā)展的分子機(jī)制，同時(shí)可用于淋巴瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)研究，為淋巴瘤的診治提供新思路；

• 分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)：用于淋巴瘤細(xì)胞相關(guān)基因、蛋白表達(dá)檢測(cè)，如RT-PCR、Western blot、免疫組化等實(shí)驗(yàn)，探究腫瘤增殖、凋亡及c-myc基因調(diào)控相關(guān)分子機(jī)制，同時(shí)可用于淋巴瘤相關(guān)標(biāo)志物的表達(dá)調(diào)控研究，為淋巴瘤診斷提供技術(shù)支撐；

• 藥物篩選與藥效評(píng)估：用于抗淋巴瘤藥物（如hua療藥物、靶向藥物、免yi治療藥物）的體外篩選，檢測(cè)藥物對(duì)細(xì)胞活性、增殖及凋亡的影響，評(píng)估藥物療效及安全性，為淋巴瘤藥物研發(fā)提供支撐，同時(shí)可用于藥物耐藥機(jī)制及聯(lián)合用藥研究；

• 其他：可用于腫瘤細(xì)胞共培養(yǎng)、淋巴瘤體外模型構(gòu)建、免疫細(xì)胞殺傷實(shí)驗(yàn)等科研場(chǎng)景，具體應(yīng)用可結(jié)合實(shí)驗(yàn)需求調(diào)整，同時(shí)可用于驗(yàn)證新型治療技術(shù)對(duì)腫瘤細(xì)胞的抑制作用，建議控制細(xì)胞傳代次數(shù)，避免傳代過(guò)多導(dǎo)致遺傳特性改變。

儲(chǔ)存與注意事項(xiàng)

（一）儲(chǔ)存條件

• 凍存細(xì)胞：置于-196℃液氮中長(zhǎng)期儲(chǔ)存，優(yōu)先選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期、活性穩(wěn)定的細(xì)胞進(jìn)行凍存，凍存時(shí)需使用腫瘤細(xì)胞專用凍存液（含20%FBS、10%DMSO、5%腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)因子），儲(chǔ)存時(shí)需確保液氮液位穩(wěn)定，避免細(xì)胞反復(fù)凍融（凍融次數(shù)≤3次），否則會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞活性下降、腫瘤特性改變或死亡，凍存后可在半年后復(fù)蘇檢測(cè)細(xì)胞存活率，確保細(xì)胞狀態(tài)良好，凍存細(xì)胞不宜長(zhǎng)期存儲(chǔ)在-80℃環(huán)境中，應(yīng)盡快轉(zhuǎn)移至液氮罐中；

• 復(fù)蘇后細(xì)胞：復(fù)蘇后的細(xì)胞需立即放入37℃水浴鍋中快速晃動(dòng)融化（時(shí)間控制在1分鐘內(nèi)），以800-1000r/min的速度離心5分鐘，去除凍存液中的DMSO后，接種至含專用wan全培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中，置于37℃、5% CO?、飽和濕度的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，24-48小時(shí)后更換培養(yǎng)基，去除死細(xì)胞及細(xì)胞碎片，新復(fù)蘇細(xì)胞24小時(shí)內(nèi)避免頻繁觀察和更換培養(yǎng)基，防止影響細(xì)胞增殖，將培養(yǎng)瓶放入培養(yǎng)箱時(shí)，可輕輕旋松瓶蓋以保證氣體充分交換（若使用透氣性瓶蓋則無(wú)需旋松）；

• 培養(yǎng)基儲(chǔ)存：配套專用wan全培養(yǎng)基需置于4℃冷藏儲(chǔ)存，避免高溫、強(qiáng)光直射，儲(chǔ)存期限不超過(guò)1個(gè)月，使用前需恢復(fù)至室溫并輕輕搖勻，解凍血清時(shí)需逐步解凍，避免快速變溫，防止產(chǎn)生血清沉淀物，血清中出現(xiàn)的纖維蛋白、磷酸鈣等沉淀物不影響細(xì)胞生長(zhǎng)，可通過(guò)離心去除，培養(yǎng)基中需添加新鮮腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)因子，現(xiàn)配現(xiàn)用，避免生長(zhǎng)因子失活；

• 運(yùn)輸條件：細(xì)胞運(yùn)輸采用干冰低溫運(yùn)輸（-80℃），運(yùn)輸過(guò)程中需做好防震、防潮措施，避免溫度波動(dòng)，運(yùn)輸時(shí)間不超過(guò)72小時(shí)，接收后立即放入對(duì)應(yīng)儲(chǔ)存環(huán)境，若無(wú)法立即儲(chǔ)存，可在干冰上暫時(shí)保存，避免常溫放置過(guò)久，運(yùn)輸過(guò)程中需做好細(xì)胞標(biāo)識(shí)，防止混淆，運(yùn)輸前可適當(dāng)調(diào)整細(xì)胞密度，確保復(fù)蘇后存活率。

（二）注意事項(xiàng)

• 本產(chǎn)品僅用于科研，嚴(yán)禁用于臨床診斷、治療或其他非科研用途，嚴(yán)禁直接接觸人體或用于人體相關(guān)實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)過(guò)程中需嚴(yán)格遵循人體細(xì)胞實(shí)驗(yàn)相關(guān)倫理要求，未預(yù)約者不得進(jìn)行細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，細(xì)胞取材及使用需符合倫理規(guī)范；

• 細(xì)胞復(fù)蘇、培養(yǎng)、傳代需嚴(yán)格遵循無(wú)菌操作原則，實(shí)驗(yàn)環(huán)境需符合細(xì)胞培養(yǎng)要求，實(shí)驗(yàn)器具需經(jīng)紫外燈照射30分鐘和通風(fēng)30分鐘后使用，操作前需用75%酒精對(duì)器具進(jìn)行消毒，避免微生物污染；該細(xì)胞系為懸浮生長(zhǎng)細(xì)胞，傳代時(shí)可采用直接吹打稀釋法，無(wú)需消化，傳代比例建議為1:3-1:5，確保細(xì)胞增殖空間，傳代過(guò)程中需避免細(xì)胞聚團(tuán)過(guò)多，可通過(guò)輕柔吹打分散細(xì)胞；

• 細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，需定期觀察細(xì)胞形態(tài)、生長(zhǎng)狀態(tài)及增殖情況，若培養(yǎng)基出現(xiàn)異常顏色，多為CO?溢出或細(xì)胞代謝異常導(dǎo)致，可輕輕旋松瓶蓋放入培養(yǎng)箱校正，異常顏色培養(yǎng)基可根據(jù)細(xì)胞狀態(tài)判斷是否繼續(xù)使用；若培養(yǎng)液變黃或變濁，可能是細(xì)胞密度過(guò)高或細(xì)菌污染，需及時(shí)傳代或丟棄處理；若發(fā)現(xiàn)真菌或霉菌污染，需用紫外燈照射培養(yǎng)箱去除孢子，并進(jìn)行消毒；培養(yǎng)過(guò)程中避免劇烈晃動(dòng)培養(yǎng)瓶，防止細(xì)胞聚團(tuán)影響增殖，定期檢測(cè)細(xì)胞活力，及時(shí)去除死細(xì)胞；

• 處理細(xì)胞支原體污染時(shí)，建議優(yōu)先更換新的細(xì)胞株，若細(xì)胞珍貴，可嘗試使用支原體清除試劑進(jìn)行治療，支原體污染易復(fù)發(fā)，需做好后續(xù)監(jiān)測(cè)，支原體污染會(huì)影響細(xì)胞增殖、腫瘤特性及藥物響應(yīng)性，需嚴(yán)格控制；

• 細(xì)胞換液時(shí)機(jī)可根據(jù)細(xì)胞狀態(tài)調(diào)整，復(fù)蘇后隔天更換一次培養(yǎng)基，后續(xù)每2-3天更換一次，換液時(shí)動(dòng)作輕柔，緩慢加入培養(yǎng)基，避免沖擊細(xì)胞，換液量為培養(yǎng)基總量的1/2-2/3，避免wan全更換培養(yǎng)基導(dǎo)致?tīng)I(yíng)養(yǎng)成分驟變，影響細(xì)胞增殖及腫瘤特性，換液時(shí)可收集上清液用于腫瘤相關(guān)蛋白或細(xì)胞因子檢測(cè)；

• 凍存細(xì)胞時(shí)，需將細(xì)胞懸液以800-1000r/min離心3-5分鐘，丟棄上清液后用預(yù)冷的腫瘤細(xì)胞專用凍存液重懸細(xì)胞，細(xì)胞密度控制在1×10?~1×10?個(gè)/ml，分裝后標(biāo)記細(xì)胞種類、凍存時(shí)間及操作人員，放入程序降溫盒置于-80℃過(guò)夜后，再轉(zhuǎn)移至液氮中長(zhǎng)期儲(chǔ)存，建立細(xì)胞凍存臺(tái)賬，便于追溯，凍存前可檢測(cè)細(xì)胞活性及c-myc蛋白表達(dá)，確保凍存細(xì)胞功能穩(wěn)定；

• 取出液氮罐中的細(xì)胞時(shí)，務(wù)必加強(qiáng)個(gè)人防護(hù)，避免凍傷；細(xì)胞操作時(shí)動(dòng)作要輕，避免劇烈吹打造成細(xì)胞機(jī)械損傷，切忌用水直接沖洗細(xì)胞，可用0.1M PBS輕輕沖洗，避免影響細(xì)胞活性及腫瘤特性；

• 實(shí)驗(yàn)過(guò)程中產(chǎn)生的細(xì)胞廢液、廢棄培養(yǎng)基及用過(guò)的培養(yǎng)耗材，需經(jīng)滅菌處理后再丟棄，避免生物污染；操作人員需穿戴無(wú)菌手套、口罩、實(shí)驗(yàn)服，做好個(gè)人防護(hù)，實(shí)驗(yàn)結(jié)束后及時(shí)消毒實(shí)驗(yàn)臺(tái)面，實(shí)驗(yàn)廢棄物需按生物安全規(guī)范處理，含腫瘤細(xì)胞及藥物相關(guān)廢液需單獨(dú)收集處理，避免交叉污染。

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